禽脑脊髓炎病毒VP1蛋白的主要宿主保护性免疫原特性及其作为诊断抗原的研究论文.pdfVIP

十目自《*Ⅸ塑坦{jr套第十AⅨ{$w讨台t蛙 样作为阳性摸板，用于标准曲线的制定。根据s1基 肠孤病毒刚性样品进行r特仲卅_、敏感性和重复性 刚。c结构美山基因保守区域设计 对拶增片断为 试验+结果表明，制作的标准曲线定龃浓度范剧宽， 比常规的RT．PCR敏感i03倍，可检测到每个反应 147bp的特异性引物．以体外转采的RNA作为标准 品，应用SYBRG…I染料法定立，检测禽呼肠孤相Yif5 2×10。个拷贝的标准品RNA(图1)，々 病毒的一步实时荧光定量RTPCR方法。对禽呼 NDV、IBDV、MG都不反应；用所建立的蓰光RI 肠孤病毒RI性样品进行了特异性、敏感性和重复性 PCR方法从15只攻毒鸡的关节组织均能检删到 5 104个拷贝／uL之目。建立的 试验。 ARV，病毒含量在10 2结果与分析 宴时荧光定量RTPCR具有特异、敏感、快速，定 R2 已知病毒株引133、1733、RI 21)3、C988、量、重复性好等优点，可用十％睐L鹏感染ARV的 IⅨ)l 检测。 526用荧光RTPCR捡测显示良好的扩增反 应曲线．融解曲线分析表明#增产物单一。对禽呼 ／／歹亏捌 一iI 1／／／／．”∥17jl l ：：=兰：兰兰：：j!兰兰!兰纠 目1#$810倍倍№稀■扩增■螭 2 6。1092 6x1082 6。ID’ M￡Ⅻ#**#tRNA#91#m＆*．卜8 2 612p2 6。1052 6。1042 6。1012 6。102#mful目#Ⅻ 禽脑脊髓炎病毒VPI蛋白的主要宿主保护性 免疫原特性及其作为诊断抗原的研究 韦莉．i菁．施蕾，用垃．她炜光，刘爵‘ neI mem#H{R膏牧兽Em究日]匕自100097F一-mail：liujue@263 前言 禽脑脊髓炎病毒(AEV)为单股正链RNA病 毒，对鸡、火鸡，鹌鹁和雉鸡致病。该病通过粪口途 往感染家禽，并能垂直传递，导致孵化率下降，感染 来源于前提蛋即VP0。研究认为其它小RNA病毒 的雏鸡在l～7H龄出现震颤，运动先调等特征，这 VPI蛋白足主要的宿土保护性免疫蛋白，它编码主 些临床特性与鸡的口龄有切棚芷．2～3周龄“上的 要的抗原位点和太多数型特异性中和决定簇。然 鸡只感染后通常不表现出神经盘状。AEV疫苗株 而．哪种结构蛋白是提供抗AEV感染的保护性免 1143株基因组长度为7055bp，拥有一个大的开放 疫原还不清楚。诊断雏鸡感染AEV的{要方法是 阅读框．编码一个由2143个氨基酸组成的尢聚合蛋检测血清中AEV抗体，最常肘的方法是免疫扩散 白，它由病雌蛋白酶水解加工成成熟的蛋白质。小 和EI|ISA．|由于垒病毒繁殖费时．费力，表达重组 -am”*Ⅻ日ⅢⅡ≈HEm自I．I…㈣H263州 呼肠孤病鼯、禽脑脊髓炎 蛋容俸为包被抗藏愁在多种病毒疾病的检测中{昙到 泣Z(2镑0 Ei毡o)混合，37℃作用ih，然后将病毒抗 应用，但在禽脑脊髓炎的诊断巾还未见报道。本研 体混禽物经卵黄囊接种6日龄SPF鹏胚，弃接种后 究采用昆墩杼状病毒表