乳腺癌转移机制的研究及其临床应用论文.pdfVIP

2008第五届乳腺癌荸庆论坛论文集 ·专家讲座· 乳腺癌转移机制的研究及其临床应用 邵志敏复旦大学附属肿瘤医院、乳腺癌研究所 乳腺癌远处转移是导致患者死亡的主要原因。迄今为止，我们虽然对乳腺癌的转移机制有所了解， 但仍有众多问题尚未解决。研究乳腺癌转移机制这一医学难题，有助于掌握肿瘤演进过程，防治乳腺癌 转移。转移相关基因和蛋白是转移发生的内在分子基础，所谓转移相关基因是一族功能上能够促进、阻 断或影响肿瘤转移潜能而不影响肿瘤细胞生长增殖的基因。乳腺癌转移过程不仅伴随着增殖相关分子 和转移相关分子之间的程序性互动，而且也受到细胞微环境、宿主因素、免疫调控等多元影响。近年来， 通过应用消减杂交、差异表达以及高通量芯片筛选等技术，从不同转移潜能的乳腺肿瘤细胞系及动物细 胞模型中筛选并鉴定了一些乳腺癌转移相关基因。自从1988年美国国家癌症研究所(NCI)分离出肿 瘤转移抑制基因nm23以来，已发现了一定数量的乳腺癌转移相关基因，但尚缺少基因和基因、基因和 蛋白、多种转移相关分子间调控网络的多元研究。 l 筛选乳腺癌转移相关基因和蛋白的策略 等，分别从细胞基质水解、侵袭、血管生成等不同角度对乳腺癌的转移产生影响。不同的癌症具有不同 的转移靶器官谱，其机制目前不得而知。乳腺癌转移最常见的靶器官为肺、肝和骨。明确乳腺癌转移的 不同靶器官亲嗜性所对应的转移相关基因，对研究转移本质、选择干预策略很有价值。当前，裸鼠异体 移植瘤模型被认为是筛选自发性高／低转移特性的乳腺癌细胞系的重要模型，并被广泛应用。我们曾采 转移灶内癌细胞进行连续6轮筛选，建立具有自发性肺高转移特性的人乳腺癌细胞系(MDA—MB一 435HM／23lHM)。运用核型分析、MrITI、流式细胞仪检测技术及基因芯片等方法，比较高转移潜能细胞 和亲本细胞间的差异后发现，MDA-MB-435HM细胞较亲本细胞倍增时间缩短，增殖速度显著加快；细胞 的侵袭能力提高约2倍；S期细胞所占的比例显著增高；亲本细胞4周肺转移率为40％，而435HM细胞 达到100％。 这些细胞遗传背景相同而转移表型不同的研究模型，为解开乳腺癌转移机制之谜提供了有力工具。 随着高通量分子筛选技术的发展，一次观察成千上万基因的表达差异已经不是什么难事。通过基因表 达芯片和蛋白组学，我们可以成功地找到高转移潜能和原代细胞之间的基因表达谱、转录本和蛋白组之 间的差异，这些差异表达往往提示行使功能的关键分子。当然，但复杂庞大的转移调控网络中，有些分 等。如何在纷繁芜杂的基因变量中找到“Driver”，对认识转移发生发展的本质和找到治疗干预的靶点， 具有重要意义。 2乳腺癌靶器官亲嗜性转移的影响因素 在乳腺癌转移机制中，多种因素协同作用，互相影响。并不是哪一方的绝对主导地位导致了乳腺癌 亲嗜性转移的启动和进展，而是多种效应造就了转移结局。按照目前的观点，主要有以下几个方面的 因素： metastasis Maspin、BRMSl(Breast 一1一 2008第五届乳晾癌币庆论坛论文集 都已有了较多研究。我们曾运用已建立的乳腺癌肺转移模型，筛选乳腺癌肺转移相关基因和蛋白，并对 明显上调。RNA干扰实验从反面验证了前述结果。裸鼠移植瘤实验也得到了和体外试验一致的结果， AFlQ表现为促进原位肿瘤生长、肺转移病灶的形成。这些结果均表明AFIQ基因能促进乳腺癌细胞生 长和转移。为进一步明确其作用机制，我们用功能基因芯片技术检测转染AFlQ前后的细胞的基因表 达变化，发现了包括EFP及Integrinor3在内共22个基因表达有变化，后续的功能学研究证实：AFIQ促 进乳腺癌细胞生长与其上调EFP有关，上调的EFP能迸一步泛素化14-3-3s，导致乳腺癌生长增殖； AFl 族的一员，具有抗氧化、促进细胞增殖分化及肿瘤形成的作用，被证明是一种促转移基因。Rab27A则 通过调节IGF．1I的浓度，影响IGF．1I下游基因如CyclinD1、MMP-7等分子的表达，对乳腺癌细胞增殖、 细胞周期分布、凋亡和侵袭发挥作用。 当然，乳腺癌转移并非单纯几个基因起作用，在这多元网络中，还有一系列ER通路相关基因为乳 腺癌细胞增殖保驾护航；肿瘤血管生成与新生淋巴