三磷酸腺苷(ATP)生物发光技术在家用纺织品生物检测中研究应用进展论文.pdfVIP

三磷酸腺苷(ATP)生物发光技术在家用纺织品 生物检测中研究应用进展 江苏省纺织产品质量监督检验研究院蒋洁蓉 蒋洁蓉 京师范大学生命科学学院生物科学学士学位 2001一一2007南京师范大学生审科学学院微生物学博士擘位 2007一一至夸江苏省纺织产品盾量监督帻马￡研究院纺织产品樘管郜副部长 全国家用坊织品标准化技术委员会($^CTC002)委员 捕矗：与恃‰的#口培养计敷*抽m．=磷酸嚎苷(ATP)生物发光☆作为自胞计数和*度Ⅻ定的}*具有”时Ⅻ定， w定范萄广，T自动化}b作，是敏度高，准啸度高，重复性*等优点．在此蒋ATP发光剥定*在#＆产。生物栓d包括# 93清镕度拴w，#女；抗茸#霉*能拴Ⅻm噩#n；托螨性能捡Ⅻ十加“嘉脬№的拄术进行目目和展望。 若键词=磷鳗雎苷，．,tTp，生轴炭光*，《鹏培养*，#镕产=，自胞计数，自胞*度 纺织品广泛应用于人们的日常生活穿着、清洁护理美容用品．以及医疗行业纱布、绷带、手术室、 病房和医护人员工作服。纺织品，尤其是家用纺织品，多为直接与人体接触的产品，其微生物污染问题 逐渐引起人们的关注。除了各类医用和清洁护理美容用品卫生洁净度的检测． ‘直为^们关注的抗微生 物整理用品如何检测其防护抑制微生物生长的性能检测也备受人们的关注。传统的琼脂培养计数方法是 国内外有关纺织品的卫生洁净度检测以及抗微生物整理用品防护抑制微生物生长的性能检测方法中计 算话苗总数广泛采用的方法，该方法是利用混释培养法来隶算细菌总数，测定范围只有一位敷(在平板 中能够计数的群体教只有30～300个，通常需要利用i阶段进行稀释，每个稀释度2个平行，共6个平 扳)，根据微生物的生长特性，培养48h或更长时问后才能计数。因此方法存在着阻下缺点；1、阶段稀 释操作复杂。2、培养加上群体计数在性质上，判进行判断时需时久。0、利用培养来繁殖细菌．尤其是 在处理有害的微生物时．随着椅测作业，孕藏着污染风险大增的危险性。4、椅测结果在实际生产的质 量控制中意义不太[林献龙]。相反，采用三磷酸腺苷(ATP)生物发光法测定．是测定样品中微生物细 胞所拥有的ATP量，然后从该量求算细茁总数，但因为ATP的测定范围根大，达到六位数，所以一般的 测定不需要阶段稀释，在试剂有准备好的前提下，操作町在20rain内完成。因此ATP生物发光计数法因 其简便、快速、准确度高、重复性好能弥补咀上传统的琼腊培养计数法的缺陷，越来越受到有关研究^ 员的关注，在纺织品有关微生物检测中也越来越多的得到研究和应用。 三磷酸腺苷(ATP)存在于从微生物到高等动植物细胞所育的生物体中。ATP在细胞体内主要作用是提 供能量．参与体内脂肪、蛋白质、糖和棱酸的代谢。是机体能量的重要来源．在维持生物体的正常机能 上有着无可替代的作用。迅速而准确地测定ATP，对于研究细胞乃堑机体的生理活性和代谢过程、进行 药物敏感实验以及卫生监控都有非常重要的意义””。对ATP进行检测，传统的方法有电泳法、高效液相 色谱法和同位素示踪法。在电泳法测定AT呻，样品需经滤纸电泳分离，再利用紫外分光光度计进行比 色，操作比鞍复杂：采用高效液相色谱法，仪器、试剂昂贵，操作手续繁琐，检测时间比较长，通常需 X101 要30min以上，且不能直接测定ATP的古量，灵敏度仅为lmol／LATP．推广应用难度较大。虽 然同位素示踪法灵敏度较高，测定方法简便，但放射性同位素对人体有危害，某些同位素半衰期长．需 要在专门的同位素实验室工作，应用范围受到限制。萤火虫素萤火虫素酶生物发光垃足目前进行A_rP快 速测定中研究较多的方法。生物荧光法基于荧光虫发光原理，通过裂解生物活体细胞释放其中的ATP， 检钡J]ATP与荧光素、荧光素酶反应的荧光光强来实现ATP的检测，而所有同类活细胞中的ATP含量大致相 同，因此，可以通过生物荧光法检测活细胞内ATP含量来间接获得样品中活生物总数，或对培养基中细 胞的活力进行判断。通过对反应条件如：ATP生物自发光光谱特点、萤火虫素酶浓度的优化、萤火虫素 浓度的优化、pH值对发光强度的影响、ATP降解效应对发光强度的影响等优化研究以及微生物样品检测