尿素氮测定.ppt

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* 血清(血浆)尿素氮测定 (二乙酰一肟显色法) 非蛋白含氮化合物包括除蛋白质以外的尿素、肌酐、肌酸、尿酸、氨基酸、核苷酸、嘌呤、谷胱甘肽等多种含氮有机物。体内氨基酸代谢产生的氨,主要经肝脏生成尿素,而后又主要经肾脏排出体外。因此,血清尿素浓度的测定是临床上应用较多的反映肾小球滤过功能的常用指标。 【原理】 尿素与二乙酰在酸性环境中加热可缩合成红色的二嗪衍生物,颜色深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定,故通常用二乙酰一肟代替,它与强酸作用,产生二乙酰。后者再与尿素反应,缩合生成红色的二嗪衍生物。 【操作步骤】--------二乙酰一肟法尿素测定 取4只试管,具体操作按下表进行。 加入物(ml) 空白管(B) 标准管(S) 测定管(人) 测定管(牛) 血清 — — 0.1 0.1 尿素标准应用液 — 0.1 — — 蒸馏水 0.1 — — — 二乙酰一肟溶液 0.5 0.5 0.5 0.5 尿素氮试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 各管混匀后,置沸水中加热15min,取出置冷水中冷却后,分光光度计波长540nm,以空白管调零比色,读取各管吸光度。 【计算】 尿素氮mg% = 测定管/标准管×0.002×100/0.1×5 = 测定管/标准管×10 【参考范围】 5-20 mg/dl *

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