【最新】应用原核表达的猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白建立一种间接ELISA诊断方法【原创精品】---厌食.pdfVIP

维普资讯 第29卷 第3期 中 国 预 防 兽 医 学 报 VO1．29．No．3 2007 年 3 月 ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicine Mar．2o07 应用原核表达的猪圆环病毒 ¨型 Cap蛋 白建立 一 种间接 ELISA诊断方法 林彦星 -，孙彦伟 z，刘镇明 ，陈靳松 ，龚善 中 ，徐 铮 (1．华南农业大学兽医学院，广东 广州 510640；2．广东省 动物防疫监督总所，广东 广州 510230； 3．华南农业大学 动物科学学院，广东 广州510640) 摘 要：本试验在最佳诱导条件下获得猪圆环病毒 Ⅱ型重组Cap蛋 白的基础上，利用HisBind蛋 白质纯化 试剂盒对表达产物进行纯化，通过Westernblot检测证 明表达产物具有 良好的抗原性。以纯化后的重组融合蛋 白作为诊断抗原，对 ELISA反应条件进行优化，初步建立了检测PCV2抗体的阃接 ELISA方法。用该法对广 东、广西一些地区收集到的380份血清样品进行检测，检测结果阳性率为 86．1％，从中随机取 90份猪血清样 品与国产商品化试剂盒检测结果对比，符合率为 95．6％，表 明本实验建立的间接 ELISA方法具有较高的敏感 性和特异性 ，适于大规模检测 PCV2血清抗体的流行病学调查。 关键词：PCV2；重组Cap蛋 白；表达；纯化；ELISA 中图分类号 ：$852．659．2；$854．44 文献标识码 ：B 文章编号 ：1008—0589(2007)03—0217—05 DevelopmentofanindirectELISA diagnostic methodwiththemainantigenticregionofPCV2capsid proteinexpressed inE．coli LIN Yan—xing’，SUN Yan—wei，LIU Zhen—ming ，‘CHEN Jin—song3，GONG Shan—zhong，XU Zheng (1．CollegeofVeterinaryMedicine，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou510640，China；2．Guangdong ProvincialVeterinaryStationofEpidemicPreventionandSupervision，Gunagzhou510230，China；3．CollegeofAnimalScience ， SouthChinaAgriculturalUniversiyt，Guangzhou510460，China) Abstract：Anindirectenzyme—linkedimmunosorbentassay (ELISA)wasdevelopedbasedonarecombinantcapsidprotein ofporcinecircovirustype2 (PCV2)．Therecombinantcapsidproteinwasexpressedundertheoptimum inducedcondition， purifi