利用基因缺陷细胞模型探讨hOGG1和hMTH1的替补作用.pdfVIP

主堡亟随堕堂苤查!Q!兰生!旦筮堡鲞箜!塑鱼坐!』里堡!丛型：丛!!些垫!!：!!!：垡：塑!：! ·197· ．基础研究． 利用基因缺陷细胞模型探讨hOGGl 和hMTHl的替补作用 柯跃斌吴双黄娟袁建辉邓平建程锦泉 【摘要】 目的通过建立基因缺陷细胞模型，探讨修复基因hOGGl与hMTHl在DNA氧化性损 伤中的作用与关系。方法利用慢病毒感染人胚肺成纤维细胞(HFL)，分别建立hOGGl基因和 hMTHl基因缺陷细胞模型。将HFL细胞在100iLLmol／L的H：02中孵育12h，分别利用高压液相色谱 串联电化学检测技术及RT—PCR技术分析8一羟基一脱氧鸟嘌呤(7，8-dihydro一8一oxoguanine，8-OXO—dG)水 平及hOGGl和hMTHl基因表达水平。结果用高滴度慢病毒感染靶细胞后得到hOGGl基因和 hMTHl基因缺陷细胞模型，hOGGlmRNA表达水平(0．09±0．02)比正常HFL细胞(1．00±0．04)下 降了9l％，hMTHlmRNA表达水平(0．41±0．04)比正常HFL细胞(1．02±0．06)下降了60％；用 100