复合酶解制备海蜇多肽抗氧化活性的研究【毕业论文】.doc

本科毕业论文 （20 届） 复合酶解制备海蜇多肽抗氧化活性的研究 1 Abstract 2 1 前言 3 2 材料与试剂 4 2.1 材料 4 2.2 试剂 4 2.3主要设备与仪器 4 3 试验方法 4 3.1 海蜇活性肽的制备 4 3.1.1 样品预处理 4 3.1.2 制备海蜇活性肽 5 3.2分离、纯化海蜇抗氧化活性肽 5 3.2.1 酶解液的活性分离（超滤） 5 3.2.2 SephadexG-15凝胶层析 5 3.3 抗氧化实验 5 3.3.1 DPPH自由基清除能力的检测 5 3.3.2还原力的检测 5 3.3.3清除羟自由基能力的测定 6 4 试验结果与讨论 6 4.1分离纯化 6 4.2海蜇初酶解液的抗氧化活性测定 6 4.3海蜇复合酶解液的抗氧化活性测定 8 5 小结 9 参考文献 10 致 谢 13 附录Ⅰ 英文翻译 14 附录Ⅱ 英文原文 19 【摘要】目的：研究复合酶解海蜇中海蜇多肽的抗氧化活性。方法：海蜇经碱性蛋白酶初酶解、胰蛋白酶二次酶解后得复合酶解液，将酶解液离心，收集上清液得海蜇活性肽粗品。粗品经超滤、SephadexG-15凝胶层析、冷冻干燥纯化得海蜇抗氧化活性肽，利用DPPH法、清除羟自由基法和力法进行抗氧化实验。<3K时的抗氧化能力最强。结论：海蜇多肽具有一定的体外抗氧化能力。海蜇是一类潜在的海洋生物天然抗氧化剂，从而为海蜇多肽的进一步开发利用提供依据。 【关键词】海蜇；多肽；复合酶解；抗氧化活性 Study on Antioxidant activity of the peptide Purified From jellyfish by composite enzymatic hydrolysis [Abstract] Objective：Research antioxidant activity of the peptide purified from jellyfish by composite enzymatic hydrolysis. Methods：Jellyfish by the alkaline protease enzyme in early、trypsin digestion in second to get compound hydrolyzate.Centrifuge the hydrolyzate,Jellyfish supernatant was the crude peptides, crude product by ultrafiltration 、SephadexG-15 gel chromatography、purified by freeze-drying to get antioxidant activity of jellyfish peptide. Using DPPH method, scavenging superoxide anion radical law and the ability to assay for anti-oxidation experiment.Results: Measured when <3K is the strongest antioxidant capacity. Conclusion：Jellyfish has a certain peptide in vitro antioxidant capacity. Jellyfish are a class of potential marine natural antioxidants. Jellyfish peptides so as to provide the basis for further development and utilization. [Key words] Jellyfish ; Polypeptide; Compound enzyme; Antioxidant activity 1 前言 生物活性肽（biologically active peptides）[1-3]是指那些具有特殊生理活性的肽类，是世界上药物及保健品研究的热点，目前通过蛋白酶解[4-7]生产的活性肽主要来源于陆地的蛋白源，如牛乳酯蛋白、大豆蛋白、玉米醇溶蛋白等。海洋生物为了适应高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生境，其蛋白质的氨基酸组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同，在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源[8-9]。近年来对海洋生物活性肽 ,特别是抗肿瘤活性肽的研究取得了很大进展。人们现如今所提取的抗肿瘤蛋白主要有从海鞘、海绵、软体动物[10]、珊瑚中提取的环行多肽，从贝类、海参、乌贼墨等中提取的糖蛋白，还有从海藻、鲎、鲨鱼软骨中提取的多肽[11]。但是