酶解制备海蜇多肽工艺条件优化【毕业论文】.docVIP

本科毕业论文 （20 届） 酶解制备海蜇多肽工艺条件优化 目录 摘　要 1 Abstract 2 1 前言 3 2 材料与试剂 4 2.1 材料 4 2.2 试剂 4 2.3主要设备与仪器 4 3 试验方法 5 3.1 预处理 5 3.2 水解酶选取 5 3.3 甲醛滴定法 5 3.4 单酶水解条件的优化 6 3.5抗肿瘤活性的测定 6 3.5.1 酶解液的分离、提纯 6 3.5.2 细胞增殖抑制率的测定 6 4 结果与讨论 6 4.1 水解酶的筛选 6 4.2 正交试验 7 4.3抗肿瘤活性测定 9 5结论 11 参考文献 11 致 谢 13 附录Ⅰ英文翻译 14 附录Ⅱ英文原文 21 [摘　要] 目的：优化海蜇的酶解制备工艺；方法：以海为材料，碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶在各自的酶解条件下对海蜇进行酶解经正交试验确定最佳酶解条件。结果：海蜇酶解的最佳浆为碱性蛋白酶在温度为55℃，料液比为1:2，加酶量为1000 U/g，时间为4h的酶解条件下对海蜇进行酶解酶解液中的氨基氮含量为41.3mg/100ml；结论：碱性蛋白酶酶解效果最佳，酶解Enzymatic Hydrolysis Process Optimization of peptide jellyfish 【Abstract】 Objective：Optimization of enzymatic preparation of jellyfish. Methods: The jellyfish as materials, alkaline protease, papain and protease trypsin were three conditions in their respective enzymatic hydrolysis of the jellyfish protein, to determine the optimal protease, and then the orthogonal test to determine the optimum hydrolysis conditions. Results：g/100ml; Conclusion：The best alkaline protease enzyme, and has good tumor suppression. Key words】Rhopilem aesculentum；ydrolysate；Active Peptide；rocess optimization 1 前言 海蜇Rhopilem aesculentum）俗称鮓鱼，隶属于腔肠动物门Coelentera）、钵水母纲Scyphozoa)、根口水母目Rhizostomeae）、根口水母科Rhizostomatidae），海蜇属Rhopilema)的无缘膜动物。海蜇蜇体呈伞盖状通体半透明青色白色或微黄色伞径可超过45 cm最大可达1 m呈半球形上伞隆起中胶层发达下伞较薄边缘具发达环肌能收缩运动[1]。世界已记录的海蜇属只有海蜇（R. esculentum）、黄斑海蜇（R. hispidum）、棒状海蜇（R. rhopalophorum）和疣突海蜇（R. verrilli）四种。前三种在我国已有记录。棒状海蜇个体小（40～100mm），伞部的中胶层薄、数量稀少，所以没有捕捞价值。作为渔业生产的主要为海蜇和黄斑海蜇两种[2]。对高血压、慢性气管炎、哮喘、热痰咳嗽、胃溃疡、单纯性甲状腺肿和颈淋巴结肿等有一定疗效[]。药理研究证明海蜇头原液有类似乙酰胆碱的作用，能降低兔的血压，并可使兔的体表（耳廓）血管及蛙的周身血管舒张，因此能够扩张血管，降低血压[]。美国Auburn大学报道用低剂量海蜇胶原质喂养实验鼠可显著减少抗原引起的关节炎发生和减轻症状[]。民间以海蜇皮、海带和海藻等量炖服有抑制癌细胞扩散作用。海蜇皮和鲜猪血炖服，可治哮喘。海蜇皮外贴还可以治疗痛风等症[]。 海蜇的蛋白占其干重的50％，其氨基酸成分种类齐全，必须氨基酸含量丰富。生长在海洋这一特殊环境（高盐、高压、缺少光照等）中的海洋生物，在其生长和代谢过程中，产生并积累了大量具有特殊化学结构的，[8-9]。 生物活性肽(Bioaetivepeptides)是蛋白质中20多个天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物。近年来，国际科学界研究发现，蛋白质经消化道酶促水解后，主要以小肽的形式吸收，比完全游离氨基酸更易、更快被机体吸收利用，改变了过去认为的人体吸收的蛋白质主要是以氨基酸的形式吸收的理论，这是“肽”研究理论和实践的重大突破。肽是涉及生物体内多种细胞功能的生物活性物质，生物体内已发现几百种肽，是机体完成各种