外源性Id3基因对肺腺癌A549细胞生物学活性的影响.pdfVIP

医堂 童生堂 生 !卷第1期 JMedPostgra，Vo1．27，No．1，January，2014 ·l5· 论 著 (基础研究) 外源性 ／d3基因对肺腺癌A549细胞生物学活性的影响 刘 阳，高德玉，张 萍，徐 敏，李晓军 [摘要】 目的 外源性分化抑制因子3(inhibitorofdifferentiation3，Id3)是一种重要的转录调控因子，参与肿瘤发生、细 胞增殖和凋亡等过程 ，文中研究 ，d3基因表达对人肺腺癌A549细胞迁移性 、侵袭性和增殖能力的影响。 方法 构建人 基因和增强型绿色荧光蛋 白(enhancedgreenfluoreeenceprotein，EGFP)真核表达载体 pEGFP／Id3，用脂质体转染技术将 pEGFP／Id3导人 A549细胞，荧光显微镜观察细胞内EGFP的表达情况 ；RT．PCR分析转染后 A549细胞 Id3mRNA的表达情况； 细胞划痕试验和侵袭小室法检测 ／d3基因对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。平板细胞克隆形成试验测定 Id3对 A549细 胞增殖的影响。 结果 成功将pEGFP／Id3融合基因转染于 A549细胞，荧光显微镜下发出强绿色荧光，pEGFP／Id3转染组 的Id3／GAPDH为 1．274±0．035，较 pEGFP转染组(0．584±0．011)和空白对照组 (0．636±0．035)明显上调 ，差异有统计学意 义(P0．05)。RT—PCR结果显示转染后 Id3基因成功表达 ，细胞划痕实验和侵袭小室法显示转染 pEGFP／Id3可明显降低 A549细胞的迁移和侵袭能力，pEGFP／Id3转染组48h的细胞迁移数明显低于空白对照组[(113．75±25．04)个]、[(254．75± 4I．O6)个J和 pEGFP转染组[(228．25±26．84)个]，差异有统计学意义(P0．OI)。平板克隆试验结果提示外源性Id3可抑 制 A549细胞增殖 ，pEGFP／Id3转染组的克隆形成率[(15．67±5．75)％]明显低于空白对照组[(37．83±4．16)％]，差异有统 计学意义 (P0．05)。 结论 外源性胁 基因可抑制 A549细胞转移及其增殖能力。 【关键词】 肺腺癌；A549细胞；侵袭；增殖 【中图分类号】 R734．2 [文献标志码】 A 【文章编号】 1008—8199(2014)01-0015-04 Exogenous／d3geneinhibitsthebiologicalactivityofhumanlungadenocarcinomaA549cells LIUYang，GAODe—yu，ZHANGPing，XUMin，LIXiao-jun (1．TheSchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicineofJiangsuUniversity，Zhenjiang212013，Jiangsu， China；2．InstituteofMedicalLaboratoryofP ，SchoolofMedicine，NanjingUniversity／NanjingGeneralHospital ofNanjingMilitaryRegion，PLA，Nanjing210002，Jiangsu，China) [Abstract] Objective Theinhibitorofdifferentiation3(Id3)，asanimpoaanttranscriptionrenglarfactor，participatesinsuch processesastumorigenesis，cellproliferationandcellapoptosis．ThisarticleaimedtoevaluatetheeffectsofId3onthemigration，inva- sionandproliferationofA549cells． Methods Recombinnateukaryoticexpression