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微生物混合堆制法处理油污土壤的净化效果 孙东平，胡凌燕，周伶俐，李亚维，杨家志 南京理工大学化工学院生物工程系，江苏 南京 210094 堆制处理工艺是处理油污土壤的一种强化的生物处理工艺。在两种油污土样的堆制中投加了四株高效石油降解菌，处理60 d后考察投加了混合菌的净化效果，主要包括油污中饱和烃、芳香烃、胶质、沥青质、总烃碳数组分相对含量的变化以及土壤中重金属含量及其水溶性的变化。结果表明：饱和烃的绝对去除量以及去除率都要高于其它三者；土样1和土样2总烃碳数组分百分比的变化幅度差别较大，呈现低碳数下降、高碳数升高的趋势，可见添加的高效石油降解菌以利用中低碳数烃类为主；该复合微生物堆制处理法对土壤的重金属污染基本无影响。 石油降解菌堆制烃重金属 中图分类号：X 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2007）0-0871-04在石油勘探、开采、运输、加工、存储及销售过程中，不可避免地会使一些石油洒落地面，造成土壤污染，使生态系统的结构和功能遭受破坏，石油中的很多有机污染物都具有作用，所以解决土壤中的石油污染这种与人类生活密切相关的问题具有重要意义。 Table 1 Physicochemical properties of crude oil in two soil samples 来源 密度(g·cm-3) 凝固点℃ 粘度mPa·s 含砂量% 土样1 0.8630 (20 ℃) 0.8352 (60 ℃) 3438 15.61 19.10 土样2 0.8988 (20 ℃) 0.8721 (60 ℃) 3235 23.49 58.18 20世纪80年代以前使用物理方法和化学方法，虽具有时间短、见效快的实效性，但存在治理不彻底、费用昂贵及二次污染严重等较明显的缺陷，现今只将此作为生物治理方法的一些辅助手段。微生物降解石油类污染物出现于20世纪80年代后期，是最有效经济、无二次污染的方法。不过目前国内外研究和运用较多的处理技术是微生物修复和堆制处理。在堆制处理过程中配合投加高效原油降解菌和优良营养物，能促进原油的去除[1-4]。另外，据文献报道，多数石油降解菌一般只能降解一种或几种烃类。不同的微生物对不同的成分有不同的降解能力，或者在降解中起到不同的作用，因此接种混合的微生物菌株可能对石油污染控制有更好的效果，且多种微生物存在土壤中，可通过竞争、共生和互生等关系来维持生态系统的平衡[5-8]，可见在堆制过程中投加高效的复合微生物来处理油污土壤将是一种非常有效的途径，主要是该方法不仅有着成本低廉、操作方便等优势，而且还可以提高土壤中营养物质的含量、优化土壤质量、重金属污染有一定的治理效果[9,10]。 先前工作已对堆制过程中的参数如温度、pH以及总油含量进行了分析，已确知该处理方法对土样1和土样2油污的去除效果较明显，去除率分别达到42.1%和44.3%。本研究主要针对60 d复合微生物堆制处理后的土样进行分析，包括石油的四种组分和碳数组分，来研究添加的高效石油降解菌的降解效果，其次考虑到试验过程中大量材料的使用，有可能会对处理土壤引入新的污染——重金属污染。目前，土壤重金属污染物中最常见及对人类和其他生物影响较大的有汞、镉、铅、砷、铜、锌、铬等。因此本试验还考察了处理前后土壤中重金属含量及其水溶性的变化，检测了土样中重金属含量及其水溶性的变化，以了解这种处理方式对重金属污染的影响。 从油污土壤中筛选得到 1.2 实验土样及油样 油样和油污土样均由某油田提供，两者的理化性质见表1和表2支撑材料：稻壳、麦麸、锯末、草木灰、炉渣。 Table 2 Physicochemical properties of two oil-polluted soil samples and control soil sample 土样 含水率 % 总氮 (mg·kg-1) 总磷 (mg·kg-1) 可溶性磷 (mg·kg-1) 氨氮 (mg·kg-1) 污染程度 (mg·kg-1) 土样1 3 32.0 9.86 6.71 27.8 4.62×104 土样2 4 49.6 6.71 2.22 22.3 3.74×104 对照土壤 23 0.20 0.67 0.20 0.11 0 肥料：鸡粪经高温灭菌、干燥，定形制成复合肥料。 细菌种子培养液（g·L-1）：蛋白胨10.0，NaCl 5.0，牛肉膏3.0；水1 L，pH 7.2。 真菌种子培养液（g·L-1）：葡萄糖10.0，蛋白胨5.0，MgSO4·7H2O 0.5，KH2PO4 1.0；水1 L，pH自然。 采用瑞士比欧公司生产的L1523型发酵罐进行扩大培养，工作体积8 L，转速200 r·min-1，通气量3 L·min-