测定步骤和方法.docVIP

粗蛋白测定 溶液配制： 1、400g/L氢氧化钠： 400g氢氧化钠溶于1000ml蒸馏水。 2、20g/L硼酸溶液： 20g硼酸溶于1000ml蒸馏水。 3、盐酸标准液：C(HCl)=0.1mol/L: 8.3ml浓盐酸，如入1000ml蒸馏水。（需要标定） 测定步骤： 一、样品的消化 1、0.5克 2、 3、加浓硫酸10毫升（过量）。 4、将消化管盖上盖后放在消化炉上加热3－4小时 中酸性洗涤纤维测定 一、溶液的配制 中性洗涤纤维溶液 乙二胺四乙酸二钠 46.525 克 四硼酸钠 17.025 克 十二烷基硫酸钠 75克 无水磷酸氢二钠 11.625 克 无水亚硫酸钠 25 克 乙二醇乙醚 25 ml 将上述试剂加入1500 ml 蒸馏水中，待全部溶解后定容到2500ml 。 酸性洗涤溶液 0.5mol/L浓硫酸: 取69.675 ml浓硫酸加到1500 ml 蒸馏水中，冷却后定容到2500ml。（需要标定） 称取50克的十六烷基溴化铵，溶于2500ml的0.5mol/L的硫酸溶液中 二、步骤 1、给纤维袋编号，记录袋重，称取样品0.5克左右，放入纤维袋中，封口。 2、将装好样品的纤维袋放入测定纤维的仪器，按照操作进行纤维的洗涤。 3、将洗好后的纤维袋放入装有丙酮的烧杯内，保证全部浸泡，浸泡时间为5 分钟。 4、浸泡后将袋子放入托盘，等丙酮味挥发完后，放入105℃烘3个小时后，取出放入干燥器，半小时后称重。 粗灰分的测定 步骤： 1、将用蒸馏水冲洗过的坩埚放入高温炉中（550±20）℃下灼烧30分钟。 2、将坩埚取出并放入干燥器中，待冷到室温后称取坩埚重。 3、称取样品2克左右，在电炉上碳化至无烟为止。 4、将碳化后的坩埚放入高温炉中（550±20）℃下灼烧3小时。 5、3小时后取出坩埚并放入干燥器中，待冷到室温后称取（坩埚+残样）的和重。 钙的测定 一、溶液的配制 EDTA 的配制：称取3.8克乙二胺四乙酸二钠溶解到200ml的蒸馏水中，加热溶解，待冷却后转入1000ml容量瓶中并定容。（需要标定） 淀粉溶液： 称取1克可溶性淀粉溶于100ml的蒸馏水中（热）。 盐酸溶液（1：3）；三乙醇胺（1:1）；乙二胺（1:1）；氢氧化钾（200g/L） 二、步骤： 1、向上次实验做出的灰分中加入盐酸溶液10ml，浓硝酸7滴。 2、小心煮沸5分钟。将溶液转入100ml容量瓶中，并用加热的蒸馏水洗涤坩埚和漏斗中的滤纸，最后定容。（得到试样分解液） 3、取试样分解液 10ml， 淀粉溶液 10 ml ， 三乙醇胺溶液 2 ml 乙二胺溶液 1ml 孔雀石绿溶液 1滴 氢氧化钾溶液 10 ml 盐酸羟胺 0.1克 钙黄绿素 少许 4、在黑背景下用EDTA滴定，直到荧光绿消失。 磷的测定 一、溶液的配制 盐酸溶液（1：1） 钒钼酸铵显色剂：（避光保存） 偏钒酸铵1.25克加入到200ml蒸馏水中，再加入250ml硝酸 钒钼酸铵25克加入到400ml蒸馏水中，加热溶解 冷却后定容至1000ml。 磷标准液：磷酸二氢钾（105℃烘3小时后）称0.2195克，溶解后转入1000ml容量瓶中，再加入3ml硝酸，定容。 二、步骤 1、向灰分中加入盐酸溶液10ml，浓硝酸7滴。 2、小心煮沸5分钟。将溶液转入100ml容量瓶中，并用加热的蒸馏水洗涤坩埚和漏斗中的滤纸，最后定容。 3、标准曲线的绘制：分别取磷标液 0，1, 2, 5, 10, 15 ml于50 ml的容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，并用蒸馏水定容。 4、移取试样分解液5ml，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，并用蒸馏水定容。 5、在波长400 nm 比色。 干物质测定 步骤： 1、将水分皿放入（105±2）℃烘箱中烘1小时，取出放在干燥器中，冷却后称重。 2、称取样品2克左右。 3、将装有样品的水分皿放入（105±2）℃烘箱中烘3小时，取出放在干燥器中，冷却后称重。