芯片诊断试剂质量控制标准.docVIP

禽流感病毒检测芯片诊断试剂质量控制标准 本所定义的生物芯片诊断试剂是指将多个生物探针寡核苷酸按预先设计的排列方式固定在特制的基质玻璃片上，用特定的方法提取并进行标记，然后与固定在基质上的生物探针特异性的结合，再用相应的检测设备（激光扫描仪）和分析方法（包括软件）进行检测、记录、分析，实现对的定性检测的试剂。 一、基本原则 （一）生物芯片诊断试剂生产用各种原料，辅料等应制定相应的质量指标，并应符合有关法规的要求。 （二）生物芯片诊断试剂的生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设备以及适宜的生产环境，获得《医疗器械生产许可证》；同时，应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》的要求建立相应的质量管理体系，形成文件和记录，加以实施并保持有效运行；还应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。 （三）生物芯片诊断试剂的研制应当按照科学、规范的原则组织研发，各反应条件的选择和确定应符合基本的科学原理。 （四）生物芯片诊断试剂生产过程中所用的物料及工艺，应充分考虑可能涉及的安全性方面的事宜。 （五）生产和质量控制的总体目标：保证试剂使用安全、质量稳定、工艺可控、检测有效。 二、物料质量控制 1、主要生物原料 生物芯片诊断试剂的主要生物原料包括模板DNA、dNTPs、引物、探针、标记物等。主要生物原料若为企业自己生产，其工艺必须相对稳定，企业应按照工艺要求对这类生物原料进行质量检验，以保证其达到规定的质量标准；若购买，其供应商要求相对固定，不能随意变更供应商，同时，供应商应提供相应的质量保证证明和相应的质量检验报告，达到生产规定的质量标准。如果主要原料（包括工艺）或其供应商有变更，进行申请。 （1）模板DNA 重组DNA：经测序验证，关键位置没有错误。1×TE溶解，浓度为1μg/μl以上，-20℃保存。 （2）dNTPs（dATP/dUTP/dGTP/dCTP/dTTP） 纯无DNase、RNase污染。-20℃以下保存。 （3）引物 序列确证；进行PCR扩增后，克隆测序鉴定验证，建立引物标准品。生产中的引物原材料为冻干粉，PAGE纯。用标准DNA模板扩增，电泳检测，谱带单一，大小正确，与对照引物比较，产物量一致。符合视为合格引物。-20℃以下保存。 （4）探针（用于阵列制备） 合成寡核苷酸：PAGE纯，每种90μg以上，提供该产品的PAGE电泳分析图谱或HPLC分析图谱。 探针序列的正确性：应用克隆鉴定的标准进行DNA杂交鉴定或测序鉴定。 纯度和浓度检测：采用电泳方法，电泳图谱没有杂带，目的条带的强度与已知浓度的标准DNA条带进行参比计算其强度。纯度较高的DNA，可用紫外分光光度计进行定量。检验合格后入库，避光、-20℃以下保存。 （5）标记物 含有激发光波长280(680nm的所有荧光分子，HPLC纯。 （6）酶 纯度＞95%， -20℃保存。 （）缓冲液 各类酶制品所需的反应缓冲液由厂家随酶制品提供。-20℃保存。 2、主要生物辅料 主要生物辅料包括酶类、核酸提取试剂、杂交液等，企业应建立相应的质量标准。主要生物辅料若为企业自己生产（配制），其工艺必须相对稳定，并按照工艺要求对这类生物原料进行质量检验，以保证其达到规定的质量标准；若购买，其供应商要求相对固定，不能随意变更供应商，同时，供应商应提供相应的质量保证证明和相应的质量检验报告，达到生产规定的质量标准。 3、主要化学原辅料 参照《中国生物制品主要原辅材料质控标准（2000年版）》分析纯级别进行检验。主要的检测指标包括：溶液外观、一般盐类检测、溶液pH值、溶解情况、干燥失重、炽灼残渣等。 主要化学原材料的供应商要求相对固定，不得随意发生变更。化学原材料在购入时，原材料的生产商必须提供该批次化学原材料的质量保证材料和质量检验报告，其质量标准应达到生产所需的质量标准。 4、其他物料 （1）载玻片 外观：明亮处用肉眼观察无缺刻，无划伤等。规格按设计要求。 激光扫描仪扫描（波长为芯片检测波长）：包被层基本均匀。 （2）试管、吸头、试剂瓶等 一次性使用，由生产厂家提供质量保证，达到设计要求。 （3）其他： 包括试剂瓶标签、铝箔袋、衬垫、可密封塑料袋、说明书、干燥剂和包装外盒等，应参照国家食品药品监督管理局颁布的《》和《建立相应质量控制标准，如数量、规格等。三、试剂盒各组分的生产 生物芯片诊断试剂产品可分成二个部分，一部分是芯片，另一部分检测用工作液。如果有配套的检测仪器，还需对仪器及处理软件的应用加以说明。 （一）芯片的生产 芯片生产的基本过程包括探针的获取方法，纯化，点样，固定。 1．探针获取 不同的芯片，主要是探针不同，生物芯片的探针合成寡核苷酸PAGE纯。要求有生产程序和质量指标及检测方法，要进行纯化，有固定的纯化程序。2．阵列的排列设计 阵列的排列包括依次