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专题一微生物的利用.doc
最新考纲
1.微生物的分离与培养
2.某种微生物数量的测定
3.培养基对微生物的选择作用
4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用
考纲解读
1.培养基的种类、营养要求及配制原则
2.无菌技术的具体操作及应用
3.运用相关技术解决微生物的分离与培养等实际问题
知识点一 微生物的培养
议一议:高温灭菌的原理是什么?
想一想:接种过程为什么要在酒精灯的火焰旁进行?
查一查:什么是菌落?它有什么用途?
知识点二 微生物的利用
分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选
想一想:什么叫选择培养基?
看一看:纤维素分解菌筛选的原理是什么?
1.培养基的配制原则
(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。
(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌为6.5~7.5,放线菌为7.5~8.5,真菌为5.0~6.0,培养不同微生物所需pH不同。
2.培养基的营养构成
(1)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐;
(2)不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
3.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项
(1)倒平板的适宜温度是50 ℃左右,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固;
(2)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
4.两种纯化细菌的方法的比较
项目 优点 缺点 适用范围 平板划
线法 可以观察菌落特征,对混合菌进行分离 不能计数 适用于好氧菌 稀释涂布
平板法 可以计数,可以观察菌落特征 吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 小贴士
自我校对:
①营养物质 ②生长繁殖 ③水 ④碳源 ⑤氮源 ⑥无机盐 ⑦特殊营养物质 ⑧氧气 ⑨温和 有害的微生物 ?芽孢 ?孢子 ?煮沸消毒法 ?巴氏消毒法 ?所有的微生物 ?灼烧 ?干热 ?高压蒸汽 ?接种环、涂布器 ?平板划线 稀释涂布平板 酒精灯火焰 固体斜面 菌落 4 ℃ 不长 污染 甘油管藏 -20 ℃ 选择培养基 尿素 稀释涂布平板法 显微镜直接计数 ×M 被测试的条件 非测试因素 纤维素 CMC—Na 微生物 倒平板 发酵产纤维素酶 葡萄糖
议一议:高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活,从而达到灭菌的目的。
想一想:因为这里是一个无菌区,可以避免杂菌污染。
查一查:菌落是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。不同细菌的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面的特征不同,它可以作为鉴别菌种的重要依据。
想一想:选择培养基是在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。目的是培养、分离出特定微生物。
看一看:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落周围形成透明圈。
,微生物的培养与应用
1.微生物的实验室培养
(1)培养基
①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
②分类和应用
划分标准 培养基种类 特 点 用 途 物理
性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂,如琼脂 观察微生物的运动、分类、鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 化学
成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽) ③培养基配方及营养要素
基本营养要素:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。
营养要素 来源 功能 碳源 无机氮源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 ①构成细胞中的物质和一些代谢产物;②既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮源 无机氮源 无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机碳源 牛肉膏、蛋白胨、核
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