克隆技术单元复习.pptVIP

* 人鼠细胞融合的杂种细胞进行有丝分裂时出现认得染色体随机丢失的现象。可以利用这一现象进行基因定位。 * 审题：两种细菌的融合，需要的具有优势的遗传性状是能够分泌具有絮凝活性的物质，又能降解石油。 审图：溶菌酶的作用，热处理细胞质和紫外线处理DNA的作用是什么？怎样筛选出AB融合菌？ 解题： （1）基础题不丢分，诱导原生质体融合，对AB的称呼要准确 （2）需要思考结合图中的热处理A的细胞质、紫外线处理DNA的目的是什么？引导学生思考热处理了细胞质后原生质体A会怎样？紫外线处理DNA 后原生质体B会怎样？融合的AB是由AB的哪些部分组成？如果AA融合或BB的融合体还能否正常完成生命活动？想清楚原理后怎样组织语言准确描述？——解题技巧训练 （3）AB融合菌为什么还要筛选？特点是技能分泌具有絮凝活性的化合物又能降解石油的细菌需要在培养基中加入石油作为唯一的氮源。 小结：高考题出新，但落脚点仍然比较基础，还有相当的难度。但是自己思考还是可以解答的。 问题：用紫外线处理DNA，使其失去活性，这样会不会使降解石油的基因也失去活性？如何是好？——紫外线能够引起基因突变也可破坏DNA分子的结构，希望没有破坏到降解石油的基因。 * 菊花组织培养中植物激素的利用 主要程序 诱导愈伤组织 诱导丛芽 诱导生根 MS培养基 标准成分 标准成分 成分减半 6-BA 0.5mg/L 2~3mg/L 0.1mg/L NAA 0.5mg/L 0.02~0.3mg/L 0.1mg/L 6-BA/NAA 适中促进愈伤组织形成 比例高利于生芽 比例低利于生根 （09福建卷）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答： （1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割。 （2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。 （3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。 植物体细胞杂交技术 植物细胞 （或原生质体） 原生质体 去壁 转基因细胞 重组细胞 组织培养 转基因植株 杂种倍性植株 基因工程 细胞融合 外植体 愈伤组织 胚状体或丛芽 营养 激素 温度 无菌 MS培养基：水、无机盐、蔗糖、氨基酸、有机酸 生长素类、细胞分裂素类 光 脱分化 再分化 工厂化生产药物 人工种子 微型(快速）繁殖 脱毒苗 单倍体育种 突变体的利用 转基因植物 杂种倍性植物 条件 条件 * （11年江苏卷）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ） A．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得 动物个体克隆 治疗性克隆和生殖性克隆 动物组织块 胰蛋白酶或 胶原蛋白酶 剪碎 分散的细胞 培养液 细胞悬浮液 原代培养 胰蛋白 酶处理 分瓶 传代培养 应用 培养液 环境条件 合成培养基 血清、血浆 抗生素 无毒无菌 适宜的温度与 pH 氧气与二氧化碳 生产生物制品：如干扰素、单克隆抗体 转基因动物、克隆动物、试管动物的培育 检测有毒物质 用于生理、病理、药理的研究 动物细胞培养的条件 条件 具体要求 无菌、无毒环境 营养物质 适宜的温度 适宜的pH 适宜的气体环境 培养液和器具的无菌处理、添加一定量的抗生素；定期更换培养液 糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子；动物血清、血浆 36.5±0.5℃（哺乳动物） 7.2～7.4 置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱 项目 动物细胞培养 植物组织培养 相同点 不同点 原理 培养基 目的 都需无菌条件；都进行有丝分裂 细胞的增殖 细胞的全能性 液体培养基，动物血清 固体培养基，植物激素 获得细胞或细胞产物 获得试管苗或细胞产物 * （12山东卷）毛角蛋白II型中间丝（KIFII）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。 （1）过程①中最常用的运载工具是__________，所需要的酶是___________和DNA连接酶。 （2）在过程②中，用__________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是____________________________。