VP4基因鉴定非EV71非CoxA16手足13病病原体漏检的研究.pdfVIP

· 1198 · 安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Sep；49(9) VP4基因鉴定非EV71非 CoxA16手足口病病原体漏检的研究 木朝宇 ，庄晓亮 ，赵 俊 ，陈敬贤 ，王明丽 摘要 目的 探讨肠道病毒VP4基因通用引物PCR诊断非 临沂市以及安徽阜阳市爆发由Ev71引起的HFMD 肠道病毒71型 (EV71)非柯萨奇病毒A组 l6型 (CoxA16) 以来，其病原学监测都集中在 EV71和 CoxA16 手足口病(HFMD)病毒方案的准确性。方法 通过肠道病 上。非EV71非CoxA16的其他引起 HFMD病原体 毒VP4基因通用引物PCR鉴定阜阳地区非EV71非 CoxA16 仅仅通过肠道病毒通用型引物进行检测。目前国内 HFMD病毒时，显示两例病毒分离株为 Sabin-1(命名为 Fy一 对非Ev71非CoxA16的HEVs检测时，常采用 VP4 01和Fy-02株)。分别采用引物EVP4／Q8和VP1特异性引 基因进行型别鉴定 。j，而该研究显示，仅采用 VP4 物对 Fy-01和 Fy-02分离株进行鉴定。结果 采用VP4基 基因PCR产物测序，尤其是 HEVs混合感染引起的 因PCR扩增产物测序证实，两例病毒分离株为Sabin-1，而采 用EVP4／Q8引物PCR扩增 Fy-01分离株却存在异常的扩增 HFMD，其结果并不完全可靠，现将结果报道如下。 条带，PCR扩增产物测序结果为柯萨奇病毒A组 l0型 (Cox— l 材料与方法 A10)；将VP4基因PCR产物制备成克隆载体挑选多个单克 隆测序结果显示 ，Fy-01分离株既存在Sabin一1VP4基 因，又 1．1 病毒株来源 两株Sabin一1疫苗分离株 Fy-O1 存在CoxA10VP4基因，证实为两种毒株混合感染。结论 和Fy-02由阜阳市疾控中心肠道病毒室提供，由阜 临床诊断为非EV71非 CoxA16HFMD的病例 ，如病原学诊 阳市疾控中心肠道病毒室对 2011—2012年阜阳市 断仅采用VP4基因PCR产物测序，特别是针对多种肠道病 第二人民医院收治入院的诊断为 HFMD患JL,~I拭 毒混合感染引起的HFMD，其结果并不完全可靠。 子标本采用人横纹肌肉瘤细胞 (humanrhabdomyo． 关键词 手足口病；VP4基因；Sabin一1；CoxA10 sarcoma，RD)和人喉癌上皮细胞 (humanlaryngeal 中图分类号 R373．25；R725．125 carcinoma，Hep-2)进行病毒分离的过程中，发现两 文献标志码 A 文章编号 1000—1492(2014)09—1198—05 株VP4基因测序定型为 Sabin．1的分离株命名为 Fy-01、Fy-02。步骤均参照2009年版的 《手足 口病 近年来，非肠道病毒 71型 (humanenterovirus 预防控制指南》进行操作。 71，EV71)非柯萨奇病毒 A组 16型 (coxsackievirus 1．2 RT-PCR扩增 采用PromegaSVTotalRNAI— A16，CoxA16)引起手足 口病 (handfootandmouth solationSystem (购 自普洛麦格公司)抽提两株 sa． disease，HFMD)暴发流行引起了人们的注意。2008