衣壳蛋白靶向灭活策略体外抑制猪瘟病毒复制地研究.pdfVIP

亚洲猪病学会第三届学术会议论文集(中文版) 衣壳蛋白靶向灭活策略体外抑制猪瘟病毒复制的研究 王忠华，李艳，赵建军，成丹，孙元，李娜，童光志，仇华吉· 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家重点兽医生物技术实验室猪传染病研究室 中国，哈尔滨1500l 关键词：衣壳蛋白靶向灭活策略；猪瘟病毒；抗病毒策略 引言 swinefcvcrvinls。 猪瘟(cl∞sicalswine佬vcr，csF)是由黄病毒科瘟病毒属成员猪瘟病毒(classical CSFV)引起的一种烈性传染性病，可表现为急性、亚急性、慢性、迟发性或者隐性感染，急性感染具有 极高的死亡率，导致巨大的经济损失。猪瘟兔化弱毒疫苗(C株)已经在很多国家得到广泛应用，具有很 好的免疫预防效果，但与此同时，也导致感染野毒猪和疫苗免疫猪难以区分，另外，弱毒疫苗也会由于母 源抗体干扰而导致免疫失败。所以，探索一种新的猪瘟防治策略是非常必要的。衣壳蛋白靶向灭活策略 (capsid-乜|翟eted 解性酶(如核酸酶)的融合蛋白，在病毒组装时随着衣壳蛋白的装配将降解性酶定位到子代病毒粒子中， 并从内部降解病毒核酸，从而达到灭活病毒的目的。本研究目的是探索cTⅥ策略应用于抗猪瘟病毒感染 的可行性。 材料与方法 1_at蛋白转导域、金黄色葡萄球菌核酸酶(SN)、猪瘟衣壳蛋白(cap) 通过融合PcR扩增获得编码HIv．1 下，通过质粒pProExHTc进行体外消化试验，验证融合蛋白的核酸酶活性。将每种融合蛋白加入到感染 病毒体外复制的影响。 结果 lOO．1000倍。 讨论和结果 研究表明，PTD具有蛋白转导功能，衣壳蛋白以及与之融合的嵌合蛋白可以在病毒粒子组装过程中， 装配到子代病毒粒子中，而核酸酶具有广谱核酸酶活性，可以降解病毒RNA，DNA。融合蛋白c印一sN由 HIv．1T乱转导域、猪瘟病毒衣壳蛋白和金黄色葡萄球菌核酸酶组成。因此借助于蛋白转导域，融合蛋白可 转导细胞并进入细胞内，随着衣壳蛋白参与病毒粒子的装配，核酸酶被导入病毒粒子内部，从而降解病毒 核酸。本研究表明，融合蛋白C卵．sN具有核酸酶活性．并且能够在病毒组装时装配到子代病毒中，导致 瘟病毒特别适合于应用衣壳蛋白靶向灭活策略。结果表明，衣壳蛋白靶向灭活策略可作为一种抗猪瘟病毒 感染的新型抗病毒策略。 致谢 本研究得到国家973计划的资助(2005cB523202)。 参考文献(略) 139