20120314微生物检验注意事项.pptVIP

微生物检验特别关注 保证有足够数量的活的细菌 *正确的方法 *正确的采集部位 *在使用抗生素前或停药3天后采标本 *尽快送检 保证标本不被污染（无菌操作方法） 保证不污染环境（生物安全） 病人准备、标本采集及运送是微生物培养质量保证的重要环节之一。 如果标本采集不当，即使有经验的实验室工作者及最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误； 标本采取与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础； 标本采取与处理不符合要求，则微生物培养的结果毫无意义。 微生物样本采集的基本原则 1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 6.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 8.送检标本应注明来源和检验目的 临床标本的分类 带菌体液 无菌体液 痰 血液 咽拭子 脑脊液 关节腔积液 粪便 胸腹水 其他类别 其他类别 尿液 细菌诱导耐药与重复药敏试验 在治疗过程中很多细菌可以由原先的敏感变为耐药，随后临床出现可疑的耐药表现，需重复进行药敏试验。 对一些耐药性容易改变的菌种应特别注意，如用三代头孢菌素治疗肠杆菌属、柠檬酸杆菌属和沙雷菌属所致感染；用喹诺酮类治疗葡萄球菌属所致感染以及用各种抗菌药物治疗铜绿假单胞菌所致感染的过程中都可能发生耐药。 何时重复分离细菌做药敏试验？ CLSI M100-S17 – 3天内即可发展为耐药： 肠杆菌属、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属–三代头孢 铜绿假单孢菌–所有抗菌药物 葡萄球菌属–喹诺酮类 金葡–延长疗程可使万古霉素敏感株变为万古霉素中介 3-4天后，试验来自身体相似部位的重复分离菌 对临床抱怨的解释 对临床所有常用的药物都进行药敏试验没有必要，也没有可能 根据CLSI建议选择的试验药物，已包括（或指示）治疗此类细菌感染所需抗生素的敏感性 一、血培养操作规范 临床常见的采血指征 体温（?38?C）或（?36?C） 、寒战 心率＞90次/分，呼吸频率＞20次/分 WBC增多（计数＞12?109/L） WBC减少（计数＜4?109/L） 血小板减少 皮肤粘膜出血 昏迷 ，休克 多器官衰竭 CRP/PCT升高 皮肤消毒程序，严格执行三步法: 1、用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上 2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿刺皮肤2遍，待干燥。 3、75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒液 ，待酒精挥发干燥后采血。 培养瓶消毒程序 * 打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血培养瓶 橡皮塞并擦干表面残余酒精 *消毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮塞处注入血培养瓶内 *用75%酒精重新消毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖 *立即送检。 血培养标本的运送 采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。 血培养瓶在采血接种后在室温不超过数小时。 血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。 采血量 成人为8～10 ml,儿童1～5 ml 有人引述多篇文章指出:对成人每增加1ml 血量平均能提高阳性率3.2% 。 采血份数和采血时机 采血培养应该在使用抗生素之前进行 间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5小时采集血液，不知发热规律应在寒战或发热后半小时后进行。（研究表明细菌常在寒战或发热前1h入血，此时采血培养最佳。） 24h内采2-3份血培养，至少做到“双侧双瓶”。 持续性菌血症：如急性心内膜炎、导管相关sepsis时需多次取血监测，特别是金葡菌时。 血培养采血量、份数与阳性率 研究表明，当每套血培养采血20ml时 一套检出率：65% 二套检出率：80% 三套检出率：96% 目前的指南推荐采集2~3套血培养 特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议 (1) 可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎,应在不同部位采集2 ～ 3 份血标本。 (2) 不明原因发热,如隐性脓肿,伤寒热和波浪热,先采集2 ～ 3 份血标本,24 ～ 36 h 后估计体温升高之前(通常在下午)再采集2 份以上。 特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议 (3) 可疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持