室内气传真菌污染的呼吸道毒作用的研究.pdfVIP

2003彳f=：环境‘-jJlfb[k医学因际学术研讨会沦文集 oftheSecondInternationalAcademicConferenceOnEnvironmentaland Medicine Proceedings Occupational 内气传真菌污染的呼吸道毒作用研究 宋伟民 阚海东 (复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室，上海，200032) 室内真菌污染是一个传统的空气污染问题，近年来由于室内装修越来越现代化，室内密闭程度的增加，通 风不良，导致室内空气真菌污染，并产生呼吸道过敏，不良建筑物综合征等健康影响。室内真菌污染与呼吸道 感染、过敏，以及真菌毒素中毒等具有重要关系。真菌是重要的气传致敏原。室内常见的真菌有青霉菌、曲霉 菌、交链孢霉菌、支孢霉菌和念珠菌等，其中交链孢霉菌和支孢霉菌已被确认是诱发哮喘的过敏原。本研究在 对室内真菌污染的数量、种类及分布变化趋势研究基础上，研究了室内常见气传真菌孢子及其代谢提取物对呼 吸道非特异免疫功能的抑制作用、细胞毒效应及遗传毒效应，并采用大鼠气管染毒方法观察了气传真菌孢子的 不良健康效应。 1 研究方法 1．1 室内空气监测 选择了三类室内环境，即居民住宅区、办公室和公共场所，每类场所取6个观测点(分有无空调取暖设施 各取3个点)，每季中旬连续3天的上午进行采样；各点检测的同时，选取该地点的室外进行对照同步检测。 速。样品于25℃培养3天后，进行菌落记数和菌种鉴定。 1．2 几种常见室内气传真菌中1，3一B—D一葡聚糖的检测 取芽枝菌属、青霉、曲霉、交链孢霉接种培养。采用G试验。试剂盒由日本SeikagakuKogyo公司提供， 按试剂盒说明书操作。 1．3 常见气传真菌的气管染毒试验研究 将空气中最常见的10种真菌孢子，按其在空气样品中的比例，配成染毒液，并制备成高、中、低三个剂 天隔日染毒，结束后进行肺灌洗及肺灌洗液分析 1．4 对人胚肺成纤维细胞毒作用及胶元合成的影响研究 将经胰蛋白酶消化贴壁的人胚肺成纤维细胞接种于96孔培养板中，同时分别加入高、中、低三个剂量组 细胞，上清液离心后观察细胞形态、存活率以及乳酸脱氢酶，氧化损伤及胶元合成等。 1．5 室内常见真菌代谢提取物对异型小鼠混合淋巴细胞反应的影响 对室内常见前五位的真菌种类，按参考文献进行代谢提取物的提取【21在无菌条件下制备DBA／2小鼠、 BALB／C小鼠脾淋巴细胞悬液分别作为刺激细胞群和反应细胞群。在96孔板中每孔加入刺激细胞和反应细胞 阴性对照组和ConA组，以确保紫外线处理的细胞不发生增殖反应。在37。C5％C02温箱中培养3天后，每孑L MTT溶液20斗l，4小时后每孔加人DMS0150斗l，MicroplateEL309酶标仪上570nm处比色定量。 加入5mg／ml 1．6 室内常见真菌代谢提取物的遗传毒性研究 室内常见真菌代谢提取物制备按参考文献进行代谢提取物的提取。遗传毒性包括Ames试验、肝细胞程序 外DNA合成试验和中国仓鼠肺细胞微核试验。以上试验均按常规方法实施研究。 X 对DNA细胞周期分析和细胞凋亡影响将HL60细胞按l 2003年环境与职业医学国际学术研讨会论文集 oftheSecond AcademicConference011Environmentaland Medicine 55 Proceedings International Occupational 不同浓度的常见气传真菌代谢产物，染毒24h结束后，各组细胞，预冷PBS漂洗，置于柠檬酸缓冲液lh以上， 作DNA细胞周期分析，并测定细胞凋亡率。 2 结果与讨论 2．1 室内空气中常见真菌污染状况 三类室内环境中办公室、住宅起居室室内菌落数有低于相应室外菌落数的趋势，只有公共场所室内菌落 数高于室外，这可能与公共场所人流密集、飞尘较多有关；同时，三类室内环境真菌菌落数经检验并无统计学 上的差异(P0．05o 表1 全年各季度不同室内采样点菌落数比