紫锥菊根的离体培养的研究.pdfVIP

湖南中医药大学学报 2007年8月第27卷 V01．27sl ofTCMUniv．ofHunan Aug．2007 278 Journal 紫锥菊根的离体培养研究 钟湘云。彭 菲，雷思琦，贺云 (湖南中医药大学药学院，湖南长沙410208) (摘要】目的摸索紫锥菊根的直接诱导及离体培养所需要的条件，并对其活性成分——菊苣酸进行初步检 测。方法以紫锥菊植株不同部位为材料。接种于不同培养基上，观察长根情况；以离体培养的根及愈伤组织为材 长根。其中以叶片为外植体长势最好：离体的根在I／2MS+NAAl．0ms／L中长势较好；薄层色谱显示紫锥菊根的培 养品中含菊苣酸。结论离体培养紫锥菊的根。有可能成为菊苣酸的一个新来源。 [关键词)紫锥菊；根；离体培养；菊苣酸；薄层色谱法 (中图分类号】a282．2[文献标识码】B (文章编号)1000-5633(2007)S1—0278--02 紫锥菊为菊科多年生草本植物，其全草可用药。 部分，切成合适的大小，分别接种于①、②、③号培养 它是国际上受到普遍重视的一种免疫促进剂和免疫 基中。 调节剂【l·21。菊苣酸是其重要的生理活性成分。现已证 2．2不定根的离体培养 明，菊苣酸具有抑制透明质酸酶的复制和抗HIV一1 将愈伤组织诱导出来的根(要求带有组织块)分 的作用。使胶原质免受自由基诱导的降解等药理活 别接种于④、⑤、⑥号培养基中。 性【3一。而紫锥菊根部含较多的菊苣酸。根的离体培养 2．3薄层色谱 比正常植物生长速度快，且培养条件可控。目前国内 2．3．1 供试品溶液的制备嘲分别收集离体培养的根 对紫锥菊的组织培养进行了一些研究．但迄今未见 和愈伤组织，洗去其上的培养基，烘干，捣碎。分别称取 有关于根的直接诱导和离体培养的报道。 10 mL，90cC水 g放入圆底烧瓶中，加40％的乙醇100 浴回流2h，过滤，收集滤液于蒸发皿中，水浴蒸干， l材料与培养条件 残渣用甲醇溶解，收集即得两份供试品溶液。 2．3．2菊苣酸对照品溶液的配置对照品由天津一 1．1植物材料 方科技有限公司提供．纯度≥98％。精取对照品1．2 通过组织培养再生的二倍体和多倍体无菌苗。 mL容量瓶中。 1．2培养基 mg。用甲醇溶解并定容到5 2．3．3 薄层测定方法 薄层板：0．5％CMC—Na饱和 2．0 愈伤组织诱导与生根培养基：①MS+IBA 硅胶G板。 1．0 1．0 mg／L+NAA ms／L；(室)MS+6-BAmsa一+NAA 展开剂：乙酸乙酯：水：甲酸=12：7：1的上层溶剂； 0．5 O．1 1．0 rag／L+2，4-Dmg／L；(固MS+6-BArag／L+ NAA1．0 0．5