生物工业分析（ 第二版） 教学课件 作者 罗建成 主编 第四章.ppt

尚辅网 尚辅网 尚辅网 化学分析法 　　（2） 仪器 　　10mL微量滴定管。 　　（3） 测定步骤 　　①中和游离酸　准确吸取酱油试样5.00mL，置100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。吸取此稀释液20.00mL于250mL锥形瓶中，加水100mL及酚酞指示剂3滴，用0.05 mol/L NaOH标准溶液滴定至刚显粉红色半分钟不褪为终点。若测酱油的总酸，则记录消耗氢氧化钠溶液体积V1，作计算总酸用。酱油的总酸以弱酸表示。 　　②氨基酸态氮的测定　向上述溶液中准确加入甲醛10.00mL，混匀，再加入百里酚蓝指示剂1mL，用0.05mol/L NaOH标准溶液滴定至兰紫色（pH9.2），记录此次消耗氢氧化钠溶液的体积V2，作计算氨基酸态氮用。 尚辅网 化学分析法 　　③空白试验　吸水100.00mL，加酚酞指示剂3滴，用0.05mol/L NaOH标准溶液中和至刚显粉红色，记录消耗氢氧化钠的体积V0，作总酸计算时的空白。在准确加入甲醛10.00mL百里酚蓝指示剂1mL，混匀，用0.05 mol/L NaOH标准溶液滴定至兰紫色，记录用去氢氧化钠溶液的体积V0′,作氨基酸态氮计算时的空白。 　　（4）计算 　　总酸（以乳酸计,g/100mL）= 　　氨基酸态氮（g/100mL）= 尚辅网 化学分析法 式中：V1——用酚酞作指示剂滴定时消耗NaOH标准溶液体积，mL； 　　　V2——用百里酚蓝指示剂滴定时消耗NaOH标准溶液体积，mL； 　　　V0——空白试验时以酚酞指示剂测定时消耗氢氧化钠溶液的体积，mL； 　　　V0′——空白试验时以百里酚蓝指示剂测定时消耗氢氧化钠溶液的体积，mL； 　　　c——NaOH标准溶液的浓度，mol/L； 　　　0.09——乳酸的毫摩尔质量，g/mmol； 　　　0.014 ——氨基酸态氮的毫摩尔质量g/mmol。 尚辅网 化学分析法 　　2．电位滴定法 　　（1）试剂 　　①0.05000mol/L NaOH标准溶液。 　　②36%甲醛溶液。 　　（2）仪器 　　自动电位滴定计或酸度计，磁力搅拌器； 10mL微量滴定管。 　　（3）测定步骤 　　①中和游离酸　准确吸取酱油5.00mL，置100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。准确吸取此稀释液20.00mL置200mL烧杯中，加水60mL，插入电极，开动磁力搅拌器，用0.05mol/L NaOH标准溶液滴定酸度计指示pH8.2，记录用去氢氧化钠液的体积V1,作计算总酸用。 尚辅网 化学分析法 　　②氨基酸态氮的测定　向上述溶液中准确加入甲醛10.00mL，摇匀，用0.05 mol/L NaOH标准溶液继续滴定至pH9.2，记录用去氢氧化钠的体积V2，作计算氨基酸态氮用。 　　③空白试验　取水80mL，用0.05mol/L NaOH标准溶液滴定至pH8.2, 记录消耗体积V0，再准确加入甲醛溶液10.00mL，继续用氢氧化钠液滴定至pH9.2，并记录此次用去的氢氧化钠溶液的体积V0′。 　　（4）计算 　　总酸和氨基酸态氮的计算同指示剂确定终点法。 尚辅网 化学分析法 第六节　其他成分的测定 　　一、脂肪的测定 　　1．原理 　　脂肪不溶于水，但能溶解于乙醚、石油醚等非极性的脂肪溶剂中。乙醚沸点低（34.6℃），溶解脂肪的能力比石油醚强，但乙醚约可饱和2%水分，含水的乙醚也同时会抽提出糖分等非脂成分，所以测定必需用无水乙醚作抽提剂。石油醚沸点较高35～45℃，用石油醚提取脂肪时，允许试样含有微量水分。乙醚、石油醚提取的为试样中的游离态脂肪，故该法测得的是游离态脂肪，而结合态脂肪未能测出来。 尚辅网 化学分析法 　　2．试剂 　　（1）无水乙醚 　　（2）精制油砂 同本章第一节水分测定三中的测定实例,糖蜜水分的测定中的说明. 　　3．仪器 索氏抽提器（图4-10） 　　4．测定步骤 　　（1）滤纸筒的准备 　　取15×8cm的定性滤纸，卷成直径2cm的圆筒，用脱脂细白线扎住，将滤纸筒的一端折入筒内，压紧成圆筒底，取少量脱脂棉放入筒底，将滤纸筒准确称重量。 尚辅网 化学分析法 图4-10 索氏抽提器 尚辅网 化学分析法 　　（2）试样的准备 　固体试样：在滤纸筒内精密称取2.000-5.000g经研细干燥的试样，试样上放一层脱脂棉，并将筒的顶端纸边折入筒内，使整个滤纸筒高约4cm（见图4-10虚线部分）。 　　半固体或液体试样：在瓷蒸发皿内准确称取试样5.00-10.00g。加入精制海砂约20 g，于沸水浴上蒸干后，在100～105℃烘干，研细，小心全部移入滤纸筒内,蒸发皿及附有样品的玻璃棒,都用蘸有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内，将筒的纸边折入筒内，使筒高约4cm.。 尚辅网 化