生物化学 教学课件 作者 常桂英刘飞 主编 第十一章 DNA的生物合成.ppt

尚辅网 尚辅网 第十一章 DNA的生物合成 DNA的生物合成 复制(replication)： 以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。 二、复制方向——双向复制 原核生物： ? 基因组是环状DNA ? 只有一个复制起始点 复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸相反的复制叉，称为双向复制。 复制时双链打开，分开成两股，各自作为模板，子链沿模板延长所形成的Y字形的结构称为复制叉(replication fork) 。 在原核生物双向复制中，DNA被描述为眼睛状。为说明方便而做的图为?形。 真核生物： ? 染色体DNA有多个复制起始点。 ? 两个起始点之间的DNA片段称为复制子(replicon)。 ? 复制子是独立完成复制的功能单位。 真核生物多个复制起始点、复制子与复制叉 顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的这股链称为领头链。 另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随从链。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 冈崎片段： ? 1968年日本生化学者冈崎用电镜及放射自显影技术，观 察到DNA复制中出现一些不连续的片段，将这些不连续的片 段称为冈崎片段。 ? 原核生物: 1000～2000个核苷酸 ? 真核生物: 100～200个核苷酸 聚合反应的特点 DNA 新链生成需引物和模板； 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行 。 二、DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol 1959 年获诺贝尔生理学或医学奖 1.聚合反应机理 ? 以单链DNA为模板 ? 以dNTP为原料 ? 引物提供3-OH ? 聚合方向为5 →3 ? 遵守碱基互补规律 （一）原核生物的DNA聚合酶 ? DNA-pol Ⅰ ? DNA-pol Ⅱ ? DNA-pol Ⅲ ? DNA-pol Ⅳ ? DNA-pol Ⅴ ? 具有5′→3′的聚合酶活性。 ? 只是在无polⅠ及polⅢ的情况下暂时起作用。 ? 对模板的特异性不高, 参与DNA损伤的应急状态修复。 是复制延长中真正起催化作用的酶。 由10种亚基组成不对称的聚合体。 α，ε，θ亚基组成核心酶，α亚基具有5‘→3’的聚合活性，ε亚基具有3‘→5’外切酶活性,θ亚基可能起组装作用。 β亚基(DNA夹子)能夹稳模板链，负责酶沿DNA模板滑动的作用。 其余亚基统称为γ-复合物, 是DNA夹子加载蛋白。 5.单链DNA结合蛋白 (single stranded DNA binding protein, SSB) 在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整性。 二、端粒DNA的复制与细胞衰老 某些病毒的生存方式。 如 HIV病毒、致癌病毒 二、DNA损伤的修复 1.直接修复——光复活 3.重组修复 复制同时的修复 4.SOS修复 SOS—求救信号 DNA损伤严重，复制受到抑制，前几种方法难以奏效时： 尚辅网 3. 终止 DNA复制无特定终止位点，复制链到达前面已复制成的片段则自动终止 尚辅网 DNA复制的三个阶段 尚辅网 第四节 真核生物DNA复制 尚辅网 一、原核与真核细胞DNA复制的特点 1. 原核细胞DNA复制的特点：单个起点，多数为双向复制，少数为单向复制 2. 真核细胞DNA复制的特点：真核细胞DNA复制与原核细胞DNA复制系统及过程基本相同，不同之处在于： （1）多个起点 （2）均为双向复制 尚辅网 （3）酶系统： ① DNA聚合酶不同，原核细胞两条链是同一种聚合酶催 化，真核细胞中是不同聚合酶催化。 ② 去除引物、填补缺口的酶不同，原核细胞中是DNA聚合 酶 I，真核细胞相应的酶还未找到。 ③ 因子不同 尚辅网 尚辅网 尚辅网 真核生物的端粒(telomere) 端粒:是真核生物染色体线性DNA末端的结构,形态学上,染色体DNA末端膨大成粒状. 组成:DNA+蛋白质 作用:1 维持染色体的稳定. 2 维持DNA复制的完整性 共同特点:富含G,C碱基的短序列多次重复，人和仓鼠端粒DNA都有(TTAGGC)n. 尚辅网 端粒酶(telomerase) 组成:RNA+蛋白质 在端粒DNA复制上,端粒酶具有: