挥发性离子对试剂应用于生物碱色谱保留行为的研究.pdfVIP

2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 挥发性离子对试剂应用于生物碱色谱保留行为的研究 王华，罗旭彪，陈 波’，姚守拙 (湖南师范大学化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室，长沙41008t) 摘要：反相离子对色谱方法研究了三种挥发性离子对试剂对十种生物碱保留行为的影响。结果 显示应用挥发性离子对试剂可以明显改善十种生物碱的分离条件。 关键词：挥发性离子对试剂；高效液相色谱；生物碱 高效液相色谱法中的反相离子对色谱法已经广泛应用于生物碱、有机酸、磺胺类药物、抗生 素和维生素的研究。然而至今没有公认且较完备的模型和理论来解释保留机理。前人提出的离子 对色谱保留机理主要有三种：离子对保留机理【11、动态离子交换机理121和离子作用机理【31。亦有 其他一些理论将此三种或其中的两种理论综合起来14j，籍以解释～些实验现象。随着液质联用分 析技术的出现，在多肽、蛋白质等物质的分析中人们开始使用挥发性离子对试剂如三氟乙酸等。 然而该类挥发性试剂对生物碱色谱行为的影响却相关文献鲜有报道。 本研究以挥发性的全氟羧酸作为离子对试剂，利用反相高效液相法分析5种中药中所含有的 生物活性成分青藤碱、木兰碱、衡州乌药碱、原阿片、药根碱、延胡素乙素(四氢巴马亭)、血根 碱、巴马亭、小檗碱、白屈菜红碱，共十种生物碱。重点研究了挥发性离子对试剂对该十种生物 碱色谱保留行为的影响并探讨相关保留机理。 1实验部分 2结果和讨论 2．1不同类型离子对试剂对十种生物碱保留值的影响 的影响趋势是一致的，即随着离子对试剂碳链的增长，而使目标分析物的容量因子变大，保留值 增加。 2．2离子对试剂浓度对保留值的影响 7 离子对试剂在固定相表面的吸附量关联到被检测的质子化生物碱的保留值f4】，则容量因子Ink 与离子对试剂浓度印的关系可由式(1)表示 ln尼。=a+blnC。 (】) 式中参数a与溶质和离子对试剂与固定相和流动相的作用性质相关；参数b与离子对试剂本身对溶 质和离子对试剂在固定相表面竞争顶替吸附相关。 十种生物碱的容量因子l叶相对于离子对试剂浓度的对数值lnCp都呈现出良好的线性关系。 七氟丁酸为离子对试剂时，Ink’-与lnCp的线性关系。 基金项目：国家“863”计划新药博士基金(No．2003AA223515) ·通讯联系人 118 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 图1 linearcurvesofPalmatine Ink-lnG 2．3流动相中有机相的浓度对保留值的影响 统计热力学方法认为流动相中强溶剂浓度f4】对溶质保留值的影响可以用简化关系式(2)表示 1n∥=a+cG (2) 参数a与溶质和离子对试剂相关，决定于它们与固定相及流动相的作用性质，c反映溶质及离 子对试剂与流动相的相互作用。 实验结果回归分析显示，随着有机相浓度的增加，十种生物碱的容量因子Ink线性下降，基 本符合关系式(2)。 参考文献： 【1】CHorvath，WMelander,eta1．Anal．Chem．，1977，49：2295—2305． S AJ 1-257． [2】RDeelder,HLinssen，et 979，241：24 a1．J．Chromatogro，1 1-245． [3】JStahlberg．J．Chromatogr．，1986，356：23 【4】邹汉法，张玉奎，