超声波法提取葡萄籽多酚的研究.pdfVIP

第四强国际甍莓与葡萄滔学术研讨会论文集 超声波法提取葡萄籽多酚的研究 李 华 沈 洁 (西北农林科技大学葡萄酒学院，陕西杨凌712100) 提要本文主要研究了超声波辅助提取葡萄籽中总多酚的最佳工艺条件。首先考察了超声 波频率、作用时间、控制温度、提取时间、料液比以及提取次数五个单因素对总多酚提取率的影 响，并在此基础上进行正交实验，确定多酚提取的最佳工艺条件：温度为45℃，频率为40kHz， 料液比为1：12，共提取5次，每次提取时间为55min。这种提取方法能够避免多酚在高温下的 分解，并极大地缩短了提取时间。 关键词超声波葡萄籽多酚提取 葡萄籽是葡萄酒的下脚料之一，因其含有较多的生物活性物质——多酚，而得到广泛的研究。葡萄籽 多酚具有较高的保健价值和药用价值，具有降低血脂、抗氧化、清除自由基、抗癌等作用m21。葡萄籽多酚 多采用有机溶剂浸提法，但是常规的方法不仅提取时间长，且得到的多酚多被氧化而失去其自身的价值。 随着现代科学的发展，许多先进的方法，如超声波提取被用于植物有效成分的提取。 超声波提取方法利用机械破碎和空化作用，加速细胞内物质的释放、扩散及溶解，从而达到提高提取 率的作用。目前，它作为一种优良的提取方法已经广泛应用于天然植物有效成分的提取，它是美国环保局 (EPA)的基本分析方法之一【31。它具有操作简便快捷、提取温度低、提出率高、提取物的结构未被破坏 等特点，尤其在热敏性成分的提取中更显示出明显的优势。目前，利用超声波进行多酚类物质提取的报道 已有很多，如：大豆异黄酮的提取‘41、茶多酚的提取衢1、虎杖中白藜芦醇的提取‘61。本实验旨在利用超声波 技术找到合适的葡萄籽多酚提取工艺，以供实验所需。 1材料与方法 1．1实验材料及主要仪器设备 实验原料：葡萄籽，来源于宁夏广夏葡萄酒厂的下脚料。经过挑选，选取颗粒比较饱满，无霉烂变质 的葡萄籽进行实验。 实验药品：甲醇(分析纯)、福林一肖卡试剂(自行配制)、20％Na2C03(自行配制)。 一可见光分光光度计。 1．2实验方法 1．2．1标准曲线的绘制 一216· A为吸光度)。 1．2．2总多酚的提取及测定 葡萄籽粉碎过20目筛，准确称取葡萄籽粉5．009，放入250ml三角瓶中，按一定的料液比加入甲醇， 在一定温度、一定频率下提取一定时间，并将几次的提取液合并，进行抽滤。滤液用旋转蒸发器减压浓缩， 回收甲醇。浓缩液转入100ml容量瓶，用甲醇定容，稀释5倍，用福林一肖卡试剂比色法测定多酚含量。 1．2．3正交实验设计 首先选取温度、频率、料液比、提取时间、提取次数五个因素进行单因素实验，然后在单因素的基础 上，确定正交实验的因素和水平(见表1)，采用k(34)进行正交实验，实验结果用数理统计的方法进行 分析。 表I 正交实验因素水平表 2结果与分析 2．1温度对超声波提取的影响 可能是由于高温有利于提取，但过高的温度会引起多酚的变性。 90 锝 警 鹾 取 65 25 35 45 55 65 75 温度 频率 图1 温度对超声波提取的影响 图2频率对起声波提取的影响 2．2频率对超声波的影响 分别在16kHz、24kHz、32kHz、40kHz条件下进行提取。图2反映出频率对提取有一定的影响，随 着频率的增加，提取率随之增加，但是统计分析发现，本实验中的各水平之间是无显著差异的。 2．3料液比对超声波提取的影响 60ml、70m1)进行提取。料液比增加，提取的溶液越多，达到饱和时能提取出的多酚也越多。因此，随着 料液比的增加，提取率也是逐渐增加的(见图3)。统计分析发现，l：12和l：14之间是没有显著差异的。