内毒素耐受的人单核细胞白血病THP-1细胞系髓系细胞触发受体1表达地研究.pdfVIP

对创面小、无明显感染或元严重感染威胁的，经济情况不佳的病人，则要权衡利弊，不应盲目滥用，以免增加 不必要的经济负担。使用Vs应配合抗感染治疗，因Vs使创面处于负压、相对隔离状态，对术前创面有感染 存在、局部渗出多者，抗厌氧菌治疗不应忽视，常规甩甲硝唑定期冲洗可防止引流管堵塞，避免感染发生或加 重。应用、噶时，每天吸出的渗出物中含大量蛋白，应注意监测、计算并及时补充营养物质，防止发生负氮平 衡。此外，应加强护理，使用中唯一的问题是吸引管道连续负压吸引后发生塌陷、堵管，或因封闭漏气导致负 压丢失．应及时更新管道或重新封闭．以免影响治疗效果。生物透性薄膜的透氧及透湿性能有限，而且毛囊、 皮脂腺的细菌会逐渐移到皮肤表面，故需定期消毒皮肤，更换生物透性薄膜。 总体而言，对有适应症的急慢性软组织缺损病人，使用Vs是一简单、安全有效的治疗方法，值得临床推 广m甩。 内毒素耐受的人单核细胞白血病THP-1细胞系髓系细胞触发 受体1表达的研究 白祥军，李占飞，杨朝晖，王海平，李波，李思齐 (华中科技大学同济医学院附属同济医院创伤外科，湖北武汉430030) 。 摘要：目的了解单核细胞在产生内毒素耐受时．核因子KB(NuclearFactorKB，NF—KB)在蛋白质水平的表达，髓系细 胞触发受体1(TriggeringReceptorExpressed佃Myeloid C 两者的关系。方法将无血清培养基培养的THP一1细胞随机分为4组(A…BD)，A为空白对照，B、C、D各分1、2,3三小 水平的表达。结果内毒索耐受组Trem一1(mRNA和蛋白)，NF—gB p65的表达组间差异均有显著意义。TREM—l 胞TREM一1下调。这可能在THP一1细胞的内毒索耐受过程中起重要作用。 关键词：内毒索耐受：脓毒症；THP一1细胞；TREM一1：NF—gB 内毒素可以诱导单核／巨噬细胞的活化并产生多种促炎因子。适度的炎症反应对机体有保护作用，但是 当机体一次受到大剂量内毒素打击时，将会引起炎性因子过度分泌，导致SIRS和脓毒症的发生，进一步进展 会导致MODS或MOF而危及生命。然而给予事先已经注射过亚致死量内毒素的动物注射致死量的内毒素 时．动物的存活率明显升高，这种现象被称为内毒素耐受。宿主的单核／巨噬细胞，暴露于脂多糖3—24小时 后再次给予细菌内毒素或LPS刺激时，其敏感性明显降低，即产生内毒素耐受【l】。研究表明：内毒素耐受在 脓毒症的发生中起重要作用。但是脓毒症发生的机制仍不是十分清楚。所以，虽然近年来重症监护治疗技 术已有很大进步。但脓毒症的死亡率仍一直居高不下。针对多个靶点阻断炎症反应防治脓毒症的研究亦均 未能取得满意效果”J。 受体，属于k超家族”1，主要介导细胞外细菌、真菌引起的急性炎症反应。它的发现被认为是近年来炎症反 应和脓毒症发生机制研究中最重要的进展之一HJ，可能成为脓毒症新的治疗靶点。 本实验在现有的研究基础上，以1HP—l为主要研究对象，探讨内毒素耐受时TREM一1的表达以及与 NF—KB之间的关系，研究TREM—l在内毒素耐受及脓毒症发生过程中的作用。 材料与方法 l细胞及分组 ·295· C 浓度到2．4×106／ml。选取12孔中的10孔。分为4组(A…B D)，A组一7L为空白对照，B、C、D各组三孔， 空白对照组，B组为LP$刺激组，C、D组为内毒素耐受组。 表1 内毒素耐受实验刺激方案 注：上表数值单位为n晷，“，o代表不禽瞒无血清RPMl—1640培养基 2主要试剂 ． 抗体(Santa Cruz生物技术公司)，辣根酶标记兔抗山羊Isc(北京中杉)，兔抗人NF—KBp65抗体(博士德公 试剂盒(博士德公司)等。 3研究方法 一个1．5ml 1．3ml细胞悬液用三去污法提取总蛋白，测定蛋白浓度，放一20℃保存备用。 3．2 RT—P