苏云金杆菌几丁质酶地研究.pdfVIP

第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会 虫晶体蛋白的死菌包囊体，杀虫晶体得到良好保护，产品田问持效期平均增加了20倍(施跃峰， 2000)。 4问题与展望 Bt是目前国内外公认的最有利用前景的无公害生物农药之一。然而，Bt在应用上长期推而不广， 至今尚未发挥应有的作用，除了其自身的局限外，主要还因为：(1)Bt发酵生产成本较高，成本尚 竞争不过化学农药；(2)国内对Bt的研究主要集中在菌种选育、基因工程、生理生化等方面，与产 业化相关的培养基筛选和发酵条件优化也常常仅限于实验室的摇瓶实验，造成了Bt发酵生产与科研 实际上的脱节，至今真正投产的仅限于HD一1、wBs等少数早期发现和发展起来的菌株，近年来各科研 单位开发的工程菌却鲜有报道；(3)溶氧浓度是限制Bt产量的主要发酵工艺，后处理工艺更是制约 Bt制剂发展的瓶颈，如何在保持低成本的前提下提高Bt的生产和提取效率是目前Bt发酵工业急 待攻克的难题。 因此加大对Bt发酵工艺的研究力度，建立从摇瓶、发酵罐小试到发酵生产的逐级放大过程，不 仅对工厂化生产具有直接的指导意义，而且有利于较快地将实验室成果转化成现实生产力。 参考文献 [2]关雄．苏云金芽孢杆菌8010的研究．1997．北京：科学出版社 0 V and for [3]Morris PConverse of30 asnutrientsources NKanagaratnamSuitabilityagriculturalproductsby-products laboratory ofBacillus ofInvertebrate production thuringiensissubsp．afzawai(HDl33)．Journal 113-120 [5]施跃峰．微生物杀虫剂研究进展．植物保护，2000，26(5)：32～34 苏云金杆菌几丁质酶的研究 彭锟1，林毅1，黄小红2，沙莉2，苏争先2，蔡文旋2，张鸿声2 (1华侨大学生物工程与技术系福建泉州362021) (2福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室福建福州I350002) 摘要：几丁质酶能通过降解昆虫中肠围食膜的几丁质而加速苏云金杆菌(Bacillus 对害虫的毒杀作用。本文就Bt内源几丁质酶的产酶特性、酶学性质、生物信息学以及与Btfl；l剂的协同杀虫作用作一回 顾，并对存在问题进行讨论。 关键词：苏云金杆菌；几丁质酶；协同作用 苏云金杆菌(Bacillus 体蛋白可以占到孢子干重的25％，对鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫有特异杀伤作用Il。2J。在田间应用 中，Bt制剂还存在抗性发展、杀虫谱窄、杀虫速度慢、防效不够稳定等问题【3。4J。 深入进行几丁质酶(EC3．2．1．14)研究有助于上述问题的部分解决。昆虫的围食膜和体壁均含有几 丁质。昆虫的不同发育阶段和不同组织对几丁质的需求与否及其需求量是不同的。如昆虫中肠几丁 质酶只在蜕皮时表达，此时围食膜中的几丁质被降解。如果昆虫在不适当的时间取食了含几丁质酶 杀虫效果。从此，科学家对几丁质酶的协同杀虫作用开展了不少研究，如Sampson等【8】通过添加几丁 110 第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会 物添加进Bt制剂，使昆虫的致死时间明显缩短。然而，这种添加外源几丁质酶的方式很难适应Bt产业 化的要求。近年来，人们逐渐把目光转向Bt自身的几丁质酶。 1．苏云金杆菌产几丁质酶特性 几丁质酶是一类差异较大的水解酶类，不同来源的几丁质酶差异很大。但不同苏云金杆菌的产 h～48 酶特性基本一致。Bt于30℃发酵72h，其产酶量达到最大【lol。一般来说，在24h，酶产量增加 最快，这可能与Bt菌株的生理有关，即此时Bt菌株处于对数