双酶传感器对大鼠血清的腹腔巨噬细胞内葡萄糖和胆固醇的同时检测.pdfVIP

第十一月垒固化#信感§学术台议潮南长沙2011年lO月22-25日 玻酶传感器对大鼠血清与腹腔巨瞧细胞内葡萄糖和胆固醇的同时检测 羹齐#Lb安雅l‘．江小爵．|阵毕．．毕女*‘，※女“．i}陋‘ cn 动脉粥样硬化是一种慢性炎症病变．病理学研 过程中失去的2个电子将在lrH的两电子俩质子 究发现巨嚆细胞内胆固醇沉积形成粥样斑块可引 的可逆传递过程中被传递至电檄衰面，两电板上生 发血管管腔变细021。数据表明．动脉粥样硬化是成的电流与葡萄糖或胆固酵的球度辐关。 糖晷病患者发病和死亡的主要原因．超过65％的请 屎病患者死于动脉粥样硬化厦其并发症pJ。研究发 现，大鼠巨噬细胞内胆固醇含量随着葡萄塘含量的 肛气拖‘l、，一 增加而升高，且巨嚏细胞内胆固酵的大量沉积是动 l≮≈。铲$== 脉粥样硬化的主要病因p”。为了撵究高血锖和胆固 醇在糖屎病引发动脉粥佯硬化过程中的作用．有必 要建立同时检测大鼠血清和腹腔巨噬细胞内葡碍 圈II艰崎传謦#∞作月m理 精和胆圈醇含量的有效实验方法。 本文研制了一种新型双酶生物传感器，用于太 2线性范围与检测限 鼠血清与腹腔巨噬细胞(PMs)内葡萄塘和胆圊醉 图2l为葡萄糖传感器和胆固醇传g器的标准 的同时检测．首先在职电极表面电聚合硫堇；然后 曲线图。葡萄蒋传感器在缸10气舡10’r∞l，L范围 将金纳米牲子固定在聚硫堇(PTH)表面，吸附盘内呈线性．线性相关系数为09987．捡蔫下限为 纳米粒子的聚磺茧不仅能够保持酶的催化活性，而 20x104mol／L(3倍信噪比)：胆固醇传感嚣的线性 且可作为舟电中心提高电子转移速率；最后用壳聚 O 糖做交联剂将葡萄塘氧化酵(GOD)，胆固醇酯酶 (ChE)和胆固酵氧化酶(ChOx)分别共价键台在职电 楹的聚硫茧层上．通过检测双电极上的氧化电流大 小即可间接捡测到葡萄谐和胆固酵的豫度。葡萄糖 传感器的线性范围为8,0x10‰0x104mo]／L．检测 限为20xI矿mol／L：胆固酵传愍嚣的线性范围为 田2．1(A)糟《辅传感$的标准曲拽．cB)H固群 2Oxl矿一叫04mol，L，检穗限为06xl矿mo儿． 结果显示该双醇传咎器灵敏度高，选择性好。该传 *培％的标准∞缱．内捕岫均*在0～L00l—I∞儿 尊器成功用于同时检测糖屎搞大鼠血清厦腹腔巨 *口#■m“m*t^“lRm∞# 啦细胞内的葡萄搪和胆固醇的含量，取得々人满意 3双酶传感器竹选择性 的结果。 尿醴(UA)和抗坏血醴(从)是血清乖l腹腔 巨噬细胞中的主要电活性小分子，可能会干扰传辟 结果与讨论 器对被分析钧的测定。本文对此进行了讨论．如罔 l双酶传感器的作用机理 3l所示。从田中可卧看出，连续交替加入20uMUA 同时检测葡萄糖和胆同醇的电化学实验原理 和20 nMAA对葡萄糖传感嚣和胆同醉传盛器都无 是将酶催化厦应和在酵活性中心和电报表面的屯 明显影响．本文还讨论了艘电援之间的空叉干扰． 子蝶介体(ETM)相结台．具体机理如图II所示． 在60tiMUA和60uMAA的存在下，向溶泣中先 I GOD和chox均含有一种氧化还原活性中心．辕黄后连续加入0．5lnM的胆