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电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值研究 【摘要】目的：探讨电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值。方法：选取我院在2013年3月~2014年3月接诊的82例肾小球疾病患者作为研究对象，所有患者都应用光镜+免疫荧光法、电镜分别进行肾组织活检，比较两种检查方法对肾小球疾病的诊断结果。结果：最终病理诊断显示IgA肾病所占比例最高，为19.51%，其次为肾小球微小病变，占9.76%，薄基底膜肾病、膜性肾病、狼疮性肾炎所占比例也较高，均为7.32%。电镜对最终病例诊断结果起完全修正作用的有19例（23.17%），起补充修正作用的有19例（23.17%）。光镜+免疫荧光检验有44例对肾活检最终病理诊断结果产生影响，占53.66%，电镜检验有38例对肾活检最终病理诊断结果产生影响，占46.34%，二者比较，差异具有统计学意义（P0.05）。结论：在肾小球疾病病理诊断中，电镜检查可为临床诊断、疾病分型、病理分期提供重要的参考信息，电镜联合光镜检查可进一步降低肾小球疾病误诊率，值得推广应用。 【关键词】肾小球疾病；肾活检；电子显微镜；光学显微镜 目前，临床诊断肾脏疾病最基本的手段仍为肾活组织病理检查，肾活检对明确肾脏疾病类型、发病机制、判断预后及评估病情进展都具有重要作用。在肾活检病理诊断中，电镜、免疫荧光/免疫组化、光镜是不可或缺的三大组成部分[1]。近年来，随着电镜技术的发展与普及，其在肾活检病理诊断中的应用优势也越来越明显，其能反映肾小球超微结构改变，对肾小球疾病的免疫荧光和光镜病理诊断进行验证和修正[2]。为进一步明确电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值，本文选取了82例行电镜、免疫荧光、光镜肾活检的肾小球疾病患者进行研究，现报道如下。 1 一般资料与方法 1.1 一般资料 选取我院泌尿内科在2013年3月~2014年3月接诊的82例肾小球疾病患者作为研究对象，本组患者均接受肾组织活检，其临床检查及实验室检查资料均完整。男45例，女37例，年龄8~75岁，平均（36.5±18.8）岁。临床表现：肾病综合征10例，血尿32例，肾炎综合征11例，蛋白尿2例，肾功能衰竭1例，溶血尿毒综合征1例。 1.2 方法 所有患者均在B超引导下行肾穿刺活检术，取肾活检标本，并将其分为3份，分别用于免疫荧光、光镜、电镜检查。 （1）第一份肾活检标本进行石蜡包埋，切片（厚度2μm），常规进行Masson（马森）、PASM（嗜银）、PAS（糖原）、HE（苏木精-伊红）染色，然后进行光镜检查；（2）第二份肾活检标本冰冻后切片（厚度4μm），用以免疫荧光检测。采用直接法检测FRA（纤维蛋白原）、C1q、C3、IgA、IgM、IgC，采用间接法进行乙肝病毒抗原检测，检测项目包括HbeAg、HbcAg、HbsAg；（3）第三份肾活检标本进行电镜检查。分别使用戊二醛（2.5%）、锇酸（1%）对活检标本进行前固定、后固定，再使用丙酮脱水，使用Epon812环氧树脂对肾组织进行常规包埋处理，使用甲苯胺蓝染色定位后切片（厚度50nm），铀、铅双重电子染色后，在H-600型电子显微镜下观察肾小球基底膜厚度、基底膜内沉积物情况、系膜细胞或基质增生情况、系膜内沉积物情况、内皮细胞及上皮细胞增生及结构变化情况、系膜与基底膜关系、足突融合程度、足细胞变性、假微绒毛形成情况等。部分疑难病例，还需进行Ⅳ型胶原α3α5染色和κλ轻链染色/刚果红染色。 1.3 观察指标 参考WHO制定的肾小球疾病分类方法、肾活检病理诊断标准，对免疫荧光和光镜检查结果进行初步病理诊断，再结合电镜检查结果做出最终病理诊断，个别疑难病例，还需结合Ⅳ型胶原α3α5染色和κλ轻链染色/刚果红染色结果做出最终病例诊断。 1.4 统计学方法 本次研究数据应用统计学软件SPSS19.0进行处理，计数资料比较采用卡方检验，P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 最终病理诊断 82例患者的最终病理诊断结果见表1。从表1可知，IgA肾病所占比例最高，为19.51%，其次为肾小球微小病变，占9.76%，薄基底膜肾病、膜性肾病、狼疮性肾炎所占比例也较高，均为7.32%。 表1 82例患者的最终病理诊断结果 疾病类型 例数 构成比 （%） 疾病类型 例数 构成比 （%） IgA肾病 16 19.51 膜增生肾炎 3 3.66 肾小球微小病变 8 9.76 内皮细胞病 3 3.66 薄基底膜肾病 6 7.32 乙型肝炎病毒性肾炎 3 3.66 膜性肾病 6 7.32 小管间质性疾病 3 3.66 狼疮性肾炎 6 7.32 IgM肾病 2 2.44 糖尿病肾病 5 6.10 Alpot综合征 2 2.44 局灶节段肾小球硬化 5 6.10 毛细血管内增生肾炎 2 2.44 紫