小鼠睾丸染色体标本的制备方法地研究.pdfVIP

小鼠睾丸染色体标本的制备方法的研究 ResearchonMouseTestisChromosomeSpecimenPreparationMethods 洪燕 罗丹 龚玮 HongYanLuoDanGongWei 江西省食品药品检验所，江西南昌330029 JiangxiInstituteforFoodandDrugControl,JiangxiNanchang330029 摘要：目的：探讨不同浓度的秋水仙素在相同的时间对小鼠睾丸染色体形成的影响。方法：选择25— 30g小鼠，秋水仙素处理，镜下观察睾丸染色体。结果：当秋水仙素浓度为6mg/kg时，其染色体的中期相最 多，分散最好。结论：秋水仙素浓度过高或过低都会导致睾丸染色体的制备。 关键词：小鼠；睾丸染色体；秋水仙素 R-331 A Abstract:Objective:Tostudytheeffectofdifferentconcentrationontheformationmousetestischromosome atthesametime.Methods:Select25to30gmouse,colchicinetreatment,themicroscopicobservationtesticular chromosome.Results:Whencolchicineconcentrationis6mg/kg,thechromosomeinterimphasemost,dispersion best.Conclusion:Colchieineconcentrationistoohighortoolowwillleadtotesticularchromosomepreparation. Keywords:Mouse;TesticularChromosome;Colchicine 鬻一 取两侧睾丸，去净脂肪，于生理盐水中洗去毛和 血污，放人盛有适量的1％的柠檬酸钠的小平皿中。 1．3．3制片 (1)低渗。用眼科镊撕开睾丸被膜，分离曲细精 管，置于37度保温的1％的柠檬酸三钠低渗液中， 室温条件下低渗30分钟。(2)固定。吸尽低渗液，各 加入10ml固定液(冰醋酸：甲醇=l：3)。第一次 固定20rain，弃固定液后，加入新的固定液固定 图一秋水仙素浓度为4mg／kg剂量时对 20rain。(3)离心。吸尽固定液，加入60％冰乙酸2ml， 软化30s。待曲细精管完全软化后，立即加入等量的 固定液，用吸管吹打均匀，移人离心管，以1000r／rain 离心10min。(4)制片。离心后，弃大部分上清液，留 下约O．5Ⅱll固定液，充分吹打成细胞混悬液，用冰 水滴片法制片，每只动物制片2-3张，空气中过夜 自然干燥。(5)染色。用Giemsa工作染液染色 10min，晾干。 1．3．4镜检观察 观察细胞分散情况，染色体形态，寻找背景清 晰、分散良好、染色体适中的中期分裂相，用油镜观 图三秋水仙素浓度为8mg／kg剂量时对 察。 小鼠睾丸染色体图片 2结果 秋水仙素浓度为4mg／kg剂量时，对小鼠睾丸 染色体不能有效地形成中期相，染色体很少； 6mg／kg的秋水仙索的作用效果良好；秋水仙素浓 度为8mg／kg剂量时欠佳。见图一、图二、图三。 3讨论 3．1秋水仙素的用量 一般在取材之前的6h对小鼠腹腔注射1％秋 水仙素，注射量为4—6mg瓜gBw。秋水仙素可以抑 制细胞分裂时纺锤体的形成，以便增加中期分裂细 图二秋水仙素浓度为6mgJkg剂量时对 胞的比例。秋水仙素的注射量非常重要。若注射量过 小鼠睾丸染色体图片 多，染色体过分收缩，会导致染色体过于短小。注射