妊娠早期小鼠子宫免疫细胞的动态变化的研究.pdfVIP

妊娠早期小鼠子宫免疫细胞的动态变化研究+ 钟秀会1王萍2宫新城1翟向和1 张铁1褚素敏1邓淑慧3 河北农业大学动科院河北保定071001；2．河北省畜牧局：3保定市畜牧局) 摘要：应用免疫组织化学方法，对妊娠早期小鼠子宫壁内的主要免疫细胞如CD4+、CDS+T淋巴 细胞、CD57+自然杀伤细胞、F4／80+[互噬细胞进行原位标记。结果发现，小鼠交配后，子宫壁内各种免疫 细胞数量均增多，以孕2d时数量最多，孕4d时数量下降。孕6d、孕8d时子宫中免疫细胞数量极少．甚 者消失。说明胚胎着床成功后，子宫局部细胞免疫水平处于抑制状态。在孕6d、孕8d均出现自发性胚胎 丢失个体。其子宫壁内各种免疫细胞数量显著高于相应天数的正常妊娠组。表明胚胎丢失与免疫细胞增 多有关。 关键词：免疫细胞：动态变化；子宫；小鼠 妊娠过程中母体与胎儿界面的免疫调节是近年来生殖免疫学研究的一个重要热点问 题。尤其是妊娠早期，胚胎着床前后，母体子宫与胚泡如何互相适应，建立起正常的胎盘 联系，在此过程中，母体免疫系统发生哪些适应性变化以保证胚胎着床成功，值得深入探 讨。 子宫免疫细胞是子宫局部免疫调节的重要组分。子宫免疫细胞通过在子宫组织中的数 量和分布变化，以及产生某些细胞因子而发挥着重要的免疫调节作用。这些免疫细胞主要 killer ceils，NK细胞)以及巨噬细 包括CD4+、CD8’淋巴细胞、自然杀伤细胞(natural 1lr)。对于T淋巴细胞在妊娠子宫中的分布已有一些研究报道”。1。但 胞(macrophages，M 关于妊娠早期小鼠子宫中CIM+、CD81淋巴细胞亚群的详细资料少见。至于小鼠自发流 产过程中，子宫CD4+、cD81细胞的数量变化，未见报道。 NK细胞在妊娠子宫中的分布研究较多降”l，但对NK细胞存在的意义仍不清楚”1。有 些报道称NK细胞可产生多种细胞因子如CSF-I，LIF等有利于胚胎着床”1。缺乏NK细胞 时导致胚胎吸收率上升”…。也有报告称，NK细胞参与介导早期胚胎丢失”’”J。研究NK 和鼠类的NK细胞．但迄今未见试验研究报道。昆明小鼠是生殖免疫学研究中常用的试验 动物，但对NK细胞在妊娠早期子宫壁中的分布、未见资料介绍。NK细胞在妊娠免疫调 节中的作用和意义值得深入探讨。有资料认为，NK细胞是妊娠中的枢纽性(pivotal)调 节细胞u81；既有利于胚胎着床成功㈣9L又可能诱发流产“3。“l。这提示，母体子宫局部免 疫反应走向Thl反应或Th2反应与NK细胞关系密切。 巨噬细胞是子宫内的一种主要的常住免疫细胞。前人研究用墨汁”…或酶…1标记法，只 能显示某些活化的巨噬细胞，特异性不强。F4／80+大鼠抗小鼠单克隆抗体为标记巨噬细胞 提供了理想手段。在子宫巨噬细胞的定位报道中可以看出，用墨汁法和用F4／80+抗体的免 +国家自然科学基金资助(No，河北省畜牧局项目(编号2001．5)。 ·292· 疫组织化学法的结果有较大差异。如Taehi等””用墨汁法在间情期鼠子宫仅见少量阳性细 胞，周占祥等“”用F4／80+单克隆抗体显示间情期子宫有大量阳性细胞。究其原因，可能是 墨汁法不能显示那些处于静止状态的巨噬细胞。有关妊娠早期子宫Mv的变化，已有较多 报道”。…。所得结果不尽一致。对于小鼠自发性胚胎吸收时子宫M1lr的变化鲜见报道。 M 1lr的分布以及与自发性胚胎吸收的关系，为研究妊娠早期子宫免疫细胞的适应性变化、 免疫调节意义以及这些细胞在自发性胚胎吸收发生过程中的作用提供了有益的参考数据。 1材料和方法 1．1试验动物 8～10周龄未经产昆明小鼠，购自国家计戈0生育委员会科学技术研究所。常规饲养， 自由采食和饮水。每日光照时间1211。经观察临床健康、适应环境1周后，阴道涂片法作 发情检查。涂片经姬姆萨(Giemsa)染色，镜下观察全部为无核角化上皮细胞判为发情。 发情者与公鼠l：1同笼过夜。次日早晨检查有阴栓者定为孕0d。 试验小鼠分别于孕0、2、4、6、8d剖杀。孕0、2、4d各剖杀5只。孕6、8d出现妊 娠失败个体。为叙述方便．将孕6、8d妊娠正常者定为6A、8A组，每组取小鼠3只。孕 6、8d妊娠失败者定为6B、8