七叶一枝花内生真菌penicillium+sp.次级代谢产物的研究.pdfVIP

七叶一枝花内生真菌penicilliumsp.次级代谢产物研究 刘艳辉 张 亮 邓张双 郭志勇 薛艳红 陈剑锋 汪鋆植 邹坤 天然产物研究与利用湖北省重点实验室/湖北省土家族医药研究所， 三峡大学化学与生命科学学院，湖北 宜昌 443002 摘要: 目的:分离活性次级代谢产物;方法:利用正相硅胶柱层析，Sephadex LH-20,HPLC等 方法分离纯化次级代谢产物;运用NMR，MS等方法确定次级代谢产物的结构;结果:分离得到8 个化合物，鉴定其分别为胡萝卜苷(1),三羟基麦角甾醇(2)，3-氢松苓酸B(3)，过氧麦角甾醇(4)，麦角甾 醇(5)，Alternariol(6)，吡啶-3-甲酸(7)，甘露醇(8);结论:植物内生真菌是各种活性物质的重要来源。 关键词: 七叶一枝花; 内生真菌; 次级代谢产物 (宜昌银 有6个甲基，其中；两个单峰甲基，分别位于8 (J．T．Baker．USA)；95％7,醇(化学纯) 海化学试剂厂)；石油醚(分析纯)(天津市科密欧O．95．0．65，说明该化合物为甾体类物质而不 化学试剂有限公司)：乙酸乙酯(分析纯)(武汉市是三萜类物质，在其一维碳谱中，发现一共35 江北化学试剂厂)；正丁醇(分析纯)(天津市博迪个碳信号，其中低场只有3个碳信号，分别位于 化工有限公司)；医用酒精(武汉市武昌中比酒 8 140．4，121．2。100．8；而化学位移为8 精分装厂分装)；次氯酸钠(天津市恒兴化学试 剂制造有限公司)；琼脂(中国惠兴生化试剂有 糖除端基碳外碳信号和甾体3位碳信号，而剩 限公司)。 余的碳信号均低于860ppm，则更加证明此化合 1．3微生物培养基 物为一个甾体类化合物；通过比较文献发现【6】， 马铃薯液体培养基：马铃薯2009，去皮，切该化合物与文献数据基本一致，因而确定该化 合物为胡萝卜苷。 碎，沸水煮30rain后，8层纱布过滤，滤液中加 入葡萄糖209，用水定容至1000mL。 化合物l的NMR数据：13CNMR(DMSO— 大米培养基：大米809，水160mL。 d6，100MHz)：8 1．4其它 柱色谱硅胶G、薄层色谱硅胶GF一254，薄层 色谱硅胶H(青岛海洋化工厂产品)；柱色谱反相45．1(CH)，4 硅胶，YMC RITI：HPLC分析柱， C—18，S-Sl山m，12 C一18，4．6mmx250 3 Agela inIn，S一5斗m；凝胶， LH-20，购自北京欧亚新技术公司。 Sephadex 11．8(CH3)。11．7(CH3)． 化合物2为无色晶体，化合物的一维氢谱 大部分信号处于商场位置，都处于0．7—2．2ppm 之间，仅有两组氢信号在较低场出现，分别处于 8 5．3l和5．22，由氢谱来看该化合物可能为甾 体或者三萜类结构，在高场中显然有6个甲基， 其中两个甲基的为单峰，其化学位移为81．65， 1．56，其余甲基为双峰：在其一维碳谱中，发现 队q卜 一共28个碳信号，其中低场只有4个碳信号， 分别位于8143．6，136．2，132．6，118．2显然是 化合物l一8的结