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实验四 公畜睾丸及母畜卵巢组织学观察 一.实验特点 实验类型：验证型实验 实验类别：专业基础课 计划学时：2学时 每组人数： 1人 二．实验目的要求 通过睾丸和卵巢光镜切片的组织学观察，了解睾丸、卵巢的组织学构造，精子发生和卵子形成的过程。重点掌握曲细精管的组织结构、支持细胞的形态结构和功能、各种生精细胞的形态特征和排列规律。 同时，了解直细精管、睾丸网的结构和睾丸间质细胞的形态与功能。 三．实验原理 睾丸、卵巢组织经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、染色、切片、封片等，在显微镜下观察，能够观察到各种生精细胞和卵细胞的形态特点，进而推断精子发生和卵子形成的过程。 四．实验仪器设备 家畜睾丸和卵巢标本、组织学切片和光学显微镜 。 五．实验内容步骤 1. 睾丸切片观察（见下图）： 被膜 外层是较薄的固有鞘膜，内层为结缔组织白膜。 （2）睾丸小叶 每个睾丸小叶内曾以为有几条精细管，实则其中只有一条或由其派生而来。 （3）曲精细管 曲精小管的管壁由外向内是由同心圆状排列的结缔组织纤维、基膜和复层生殖上皮构成，皮主要有两种细胞，即生精细胞与支持细胞，细胞细长形，位于生精细胞之间，辐射状排列在基膜上，细胞顶端形状不规则，突入管腔中，和邻近的支持细胞互相组成网状。在支持细胞胞质中可见附着很多精子。生精细胞是直接形成精子的细胞，数量比较多，成群地分布在支持细胞之间。 ①精原细胞 是睾丸中最幼稚的生精细胞，位于精细管上皮的最外层，直径约为12μm，细胞核为圆形或卵圆形，有１～２个核仁。一般可分为三个类型，即A型精原细胞、中间型精原细胞和B型精原细胞。 A型精原细胞 A型精原细胞特点为细胞质少，呈椭圆形，细胞较大，长轴与基底膜平行。 中间型精原细胞 细胞大而圆，附于基底膜，核圆形，染色体呈颗粒状，核染色浅、有一两个核仁、紧贴核膜，胞质中无糖元。 B型精原细胞　细胞较小，与基底膜接触较少，核圆形、核仁不规则。 ②精母细胞 初级精母细胞：位于精原细胞上面，排列成几层，也常显有分裂现象，细胞呈圆形，体积较大。核亦呈球形。富有染色体，着色较深，其染色体因处于不同的活动期而呈细线状或粗线状。在最初阶段与精原细胞不易区分，随着细胞向管腔移动而离开基膜，同时胞浆不断增多，胞体变大，具有显著的胞核。 次级精母细胞：位于初级精母细胞的内侧，体积较小，细胞也呈圆形，核球形，染色质细粒状，最大特点是不见核仁，由于它很快就分裂，所以在同一位置上若有它存在则无精子细胞存在。 ③精子细胞 细胞大都靠近曲精细管的管腔，也常排列数层，并且多聚集在足细胞远端的周围，细胞体积更小，胞核小，着色略深，胞浆少。 ④精子 附着在足细胞上，状。头部染色很深，常深入足细胞顶部的胞浆中。精子发育成熟后，脱离曲精细管的管壁，游离在管腔中。 2．卵巢组织学观察 卵巢表面覆盖一层单层扁平或立方的表面上皮，称生殖上皮。生殖上皮下为薄层致密结缔组织构成的白膜。卵巢的外周部分称皮质，中央为髓质。皮质较厚，含有不同发育阶段的卵泡以及黄体和退变的闭锁卵泡等，卵泡间的结缔组织富有网状纤维和梭形基质细胞。髓质由疏松结缔组织构成，与皮质无明显分界，含有许多血管和淋巴管等。近卵巢门处有少量平滑肌束及门细胞（见下图）。 （1）原始卵泡 原始卵泡位于皮质浅部，体积小，数量多。卵泡中央有一个初级卵母细胞，周围为单层扁平的卵泡细胞。卵泡细胞具有支持和营养卵母细胞的作用，卵泡细胞与卵母细胞之间有许多缝隙连接。 （2）初级卵泡 初级卵母细胞体积较大，卵泡细胞由单层扁平变为立方形或柱状。在初级卵泡早期，卵母细胞和卵泡细胞之间出现一层含糖蛋白的嗜酸性膜，称为透明带。 （3）次级卵泡 随之细胞增殖成多层。在排列紧密的卵泡细胞间开始出现考尔－爱克斯诺小体，其数量随卵泡的生长而增多。小体为圆形囊泡，腔面是一层基膜，周围紧密排列的卵泡细胞，腔内含有卵泡细胞分泌的物质，参与卵泡液的形成，卵泡体积更大。 （4）生长卵泡 卵泡细胞间出现一些不规则的腔隙，并逐渐合并成一个半月形的腔，称为卵泡腔，腔内充满卵泡液。卵泡液是由卵泡细胞分泌和卵泡膜血管渗出液组成。随着卵泡液的增多及卵泡腔扩大，卵母细胞居于卵泡的一侧，并与其周围的颗粒细胞一起突向卵泡腔，形成卵丘。此时初级卵母细胞直径可达100～150/μm。紧贴透明带的一层柱状卵泡细胞呈放射状排列，称放射冠。分布在卵泡腔周边的卵泡细胞较小，构成卵泡壁，称为颗粒层。在卵泡生长过程中，卵泡膜分化为内、外两层。内膜层含有较多的多边形或梭形的膜细胞及丰富的毛细血管，膜细胞具有分泌类固醇激素的结构特征。外膜层主要由成纤维细胞构成。 （5）成熟卵泡 成熟卵泡是卵泡发育的最后阶段。卵泡体积