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目 录
前 言 1
实验一 细胞形态结构的观察及大小测定 2
实验二 动物细胞的显微结构 4
实验三 DNA的细胞化学反应——Feulgen反应 5
实验四 细胞有丝分裂各期观察 8
实验五 细胞凝集反应 12
实验六 细胞膜的渗透性 14
实验七 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察 16
实验八 线粒体和液泡系的超活染色与观察 18
实验九 细胞核与线粒体的分离与观察 21
实验十 外来化合物的毒性测定 25
附一 离心机转数与离心力的换算表 28
前 言
细胞生物学实验课的教学目的,主要是通过基本技能训练以及观察分析实验结果,使学生了解并掌握有关的实验技术原理和操作方法,进而培养学生动手实践、观察分析和解决问题的能力。为达到此目的,实验内容自成体系,着眼于加强学生的基末技能训练,以及观察分析问题和科学思维能力的培养。
细胞生物学实验绘图方法与要求
一、在仔细观察的基础上,选择典型结构进行描绘,要求真实、准确(注意各部结构的比例关系)。
二、用铅笔绘图,线条要明确清晰,图的深浅明暗一律以点的疏密来表示,点要圆而一致,不得涂暗影或进行其它美术加工。
三、各部结构名称要在一侧引直线注明。各引线要平行不得交叉。
四、每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得当并注意纸面的整洁。
实验室规则
一、遵守实验纪律,按时到达实验室,不得迟到或早退。实验中途因故需外出时应向任课教师请假。
二、进入实验室之前要换好白大衣。
三、保持实验室安静,不许在实验室内大声喧哗及随意走动。
四、必须严肃认真地进行实验。实验期间不得进行任何与实验无关的活动。
五、实验室内各组仪器及器材由各组自已使用,不得互相调换。要爱护仪器、标本和设备。如遇仪器损坏或不灵,应及时报告任课教师,以便修理或更换,不要自行乱修。损坏器材或设备者应按有关规定进行赔偿。
六、注意节约实验材料、药品和水、电等。
七、保持实验室内清洁整齐。实验结束后,各组必须认真清理各自的实验台面,将器材清洗后点清数目,然后摆放整齐。班级值日生负责清扫室内卫生,关好水、电开关和门、窗等,经教师允许后方可离开实验室。
八、有不遵守上述要求者,任课老师将终止其实验,并取消其当堂实验成绩。
实验一 细胞形态结构的观察及大小测定
一、实验目的:
1、观察几种细胞的形态结构及植物细胞的胞间连丝。
2、掌屋用测微尺测定细胞大小的原理和方法。
二、实验原理:
测微尺分物镜测微尺(简称物微尺或台微尺)和目镜测微尺(简称目微尺),两者配合使用,可以测量细胞大小。目微尺是一个可以放在目镜内的特制玻璃圆片,圆片中央刻有一条直线,此线分为若干格。物微尺为一载玻片中央封固的小尺,长1mm,被等分为100格,长为0.01mm(10μm)。当测量细胞大小时,不能用物微尺直接测量细胞,而只能使用目微尺。因目微尺测量的细胞是经物镜放大后的像,而它每格所代表的实际长度随物镜的放大率而变,在测量时需要先用物微尺来标定,求出某一放大率时目微尺每格所代表的实际长度,然后再用以测定细胞大小。
将物微尺放在显微镜的载物台上,小心转动目镜测微尺,移动物微尺使两尺平行,起点线重合,然后找出另一处两尺刻度重合处,记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数(格数),按下式计算,在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度:
物微尺格数
目微尺每格所代表的实际长度 = × 10μm
目微尺格数
例如:目微尺是100格,其对应的物微尺是80格,则目微尺每格所代表的实际长度为80/100×10=8μm。
测量某一细胞时,如果目微尺测得其横径为5格,则此细胞横径为8×5=40μm。
三、实验用品:
普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、消毒牙签、烧杯、吸管、0.9%生理盐水、0.1%亚甲基兰、蒸馏水、吸水纸。
四、实验材料:
口腔黏膜上皮细胞;洋葱内表皮;西红柿;芹菜;韭菜;红辣椒。
五、方法步骤:
(一)、细胞形态结构的观察:
1、涂片法:人口腔上皮细胞的观察:
1)、在洁净的载玻片中央,滴一滴生理盐水。
2)、用消毒牙签的一端,在漱净的口腔侧壁上轻轻地刮几下。
3)、把牙签上附有碎屑的一端,放在载玻片上的生理盐水滴中涂匀。
4)、用镊子夹起洁净的盖玻片,将它的一边先接触载玻片上的生理盐水滴,然后,轻轻地盖在水滴上。然后在盖片的一侧加一滴0.1%亚甲基兰染液,在盖片的另一侧用吸水纸吸取,染色后细胞核被染成深蓝色,细胞质浅蓝色。
5)、用显微镜观察细胞形状,细胞呈扁平鳞状。
2、西红柿果肉细胞涂片制作似人口腔上皮细胞,但将生理盐水换成蒸馏水,且不必染色就可直接观察。细胞大小和
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