高压均质法提取云芝胞内糖肽分析.pdfVIP

藏 2010(3) 噍 嗣萄 酗 《 均 质 法 提 取 云 芝 胞 内 糖 肽 钱 强 陆震鸣 许泓瑜 (1江苏苏中药业集团股份有限公司，江苏姜堰，225500；2江南大学医药学院制药工程研究室，江苏无锡 214122) 摘 要 采用高压均质法破碎液态发酵法生产的云芝菌丝体 ， 液体种子培养基 中，28℃，160r／min，培养 5d后 ，接种 3．5L发 分析其对产品含量及得率的影响。以云芝胞 内糖肽多糖含量为 酵培养基 内，接种量为 10％，搅拌转速 150~500rm／in，通风 比 指标 ，采用 (3)正交试验法 ，确定 了提取云芝胞内糖肽最佳工 1：0．6，温度 28℃，培养 4d，装液量 3．5L，罐压0．2MPa。发酵液 艺为均质压力 120MPa，料液 比 1：20，均质次数 1次。与传统水 过滤获得菌丝体 ，去离子水洗涤后用于制备云芝胞内糖肽。 提法 比较 ，高压均质法能明显提高云芝胞 内糖肽的得率 。 1．5 水提取法提取云芝胞 内糖肽 云芝菌丝体 以料液 比 关键词 云芝 深层发酵 胞 内糖肽 高压均质法 1：50加入去离子水 (pH7．0)，煮沸 2h，滤液经减压浓缩至原 文章编号 1000—8357(2010)03—0067-02 体积 l，3。浓缩液中加入 3倍体积无水乙醇进行沉淀，沉淀过 云芝 (Coriolusversicolor(L)Fr)味甘 、淡 ，性微寒 ，有健脾 滤烘干得云芝胞 内糖肽[516[·1。 利湿 ，止咳平喘，清热解毒 ，抗肿瘤的功效[1J。现代药理研究表 1．6 高压均质法制备云芝胞 内糖肽 云芝菌丝体 以料液 比 明云芝胞 内糖肽为该菌的主要有效组分，具有抑制肿瘤 、抗溃 l：20加入去离子水 (pH7．0)。采用高压均质机进行破碎 ，均质 疡 、保肝 、抗病毒 、降血脂 、抗衰老等多种药理作用闭。 压力 120MPa，均质次数为 1次 。均质液中加入3倍体积无水 据报道 ，高压破碎提取可以大大提高有效成分 的提取得 乙醇进行沉淀，沉淀过滤烘干得云芝胞 内糖肽 。 率 ，具有操作步骤简单 、自动化程度高 、节省水 、电、煤 的消耗 1-7 质量指标 的测定 等特点。该技术利用高压条件下 的混悬液 ，通过调节限流缝隙 1．7．1 总糖 、还原糖和 多糖含量测定 总糖含量测定采用苯 过程中失压 、膨胀 、爆炸 、剪切和高速撞击等综合效应 ，将在液 酚一硫酸法 ，还原糖含量测定采用 DNS法。多糖含量 ／％=总糖 体中的颗粒粉碎至直径 0．1-2Ixm，平均直径1m，这个过程 含量／％一还原糖含量，％，均为国家药品标准 (WS—XG一02l一 集超声波粉碎 、胶体磨、球磨功能于一体 ，颗粒面积 的增大及 2002)所提供的方法。 高压带来的综合效应 ，极大地加速 了可溶物 的渗透和扩散 1。 1．7．2 云芝糖肽含量测定 福林酚试剂法 ，国家药 品标准 目前，高压均质机 已经广泛用于食品，药品，化妆品等行业 ， (WS—XG一021—2002)所提供的方法。 但国内外采用高压均质法提取云芝包 内糖肽 尚属空 白。试验 1．7-3 相对分子质量 的测定 采用高效凝胶渗透色谱法 采用高压均质技术对云芝胞内糖肽进行提取 ，并对相关均质 (HPGPC)进行测定，液相色谱仪为 WATERSTM600，凝胶色谱 条件进行 了优化 。