黄绿蜜环菌液体培养几种胞外酶的测定分析.pdfVIP

理 生 化 程 学黾 辕 4i．确苗 2010(3) 黄 绿 蜜环 菌液体 培养 几种胞 外酶 的测 定 焦迎春 余 梅 唐 达 (1青海大学生物科学系，青海西宁 810016；2青海普兰特药业有限公司，青海西宁 810007；3博福一益普生(天津)制药有限公司，天津 300384) 摘 要 在黄绿蜜环菌 rmillarialuteo--virens)液体发酵培养 重复。酶活力以样品与底物反应 30min后光密度 的改变值表 过程 中，对羧 甲基纤维素酶 (CMCase)，漆酶 (Lacease)，淀粉酶 示。①羧甲基纤维素酶活力测定 ；②漆酶活力测定 ；③淀粉 (Starehase)，过氧化物酶(Peroxidase)，锰过氧化物酶(Manganese 酶活力测定4[1；④锰过氧化物酶活力测定6[1；(过氧化物酶活 peroxidase，MnP)，蛋 白酶 (Prolease)六种重要的胞外酶间隔24h 力测定 ；⑥蛋白酶活力测定I8]。 测定酶活力。结果如下 ：淀粉酶 、锰过氧化物酶 、羧甲基纤维素 1．2．4 发酵液pH测定 用 pHS=3C数字酸度计测量 。每组 3 酶 、漆酶和过氧化物酶的酶活均有较大变化 ，产酶高峰期也不 个重 复。 同；菌丝体重量在第6天达最大值，可作为菌丝体(液体菌种)收 1．2．5 氨基酸含量测定 茚三酮法 。 获期。 1．2．6 生物量测定州【 干重法。 关键词 黄绿蜜环菌 胞外酶 酶活力 文章编号 1000—8357(2010)03—0006—02 2 结果与讨论 黄绿蜜环菌(Armillarialuteo-virens)，俗名黄蘑菇 ，在 自 2．1 酶活力测定结果 然条件下，生长于高寒嵩草草甸上 ，并与嵩草属 (Kobresia)植 由图 1可以看出，在黄绿蜜环菌分批液体深层培养过程 物形成菌根 。主要分布于青海 、西藏海拔25oo～4500in的草 原或高山草甸上 ，单生或群生 ，形成蘑菇圈。四川西部 、甘肃南 部等地也有少量分布…。黄绿蜜环菌子实体肥厚 ，味道鲜美 ， 香气浓郁 ，营养丰富，是一种名贵食用菌 ，也是一种重要 的高 原生物资源。近年来 ，野生黄绿蜜环菌的过度采食 ，加上退变 的生境致使发生量逐年减少 ，市场需求增加和产量趋减使供 需矛盾Et见突出，并对该野生物种造成严重威胁 。而黄绿蜜环 菌属于外生性菌根菌，其人工栽培子实体难度相当大I21。有研 究表明3[】黄绿蜜环菌菌丝与子实体营养成分类似 ，采用液体发 酵菌丝的方法获得子实体进行资源的开发利用具有重要 的意 时间／d 义 。试验对黄绿蜜环菌液体培养过程中酶的活性变化进行 了 测定，旨在为这一高原野生珍稀食用菌资源的开发提供一定 的营养生理基础理论 。 0．6 1 材料与方法 。一4 1．1 供试材料 ①供试菌种 ：供试的黄绿蜜环菌由青海大学 生物科学系微生物实验室提供。②试验培养基：葡萄糖 15g，L， 0．2 酵母膏5gL，磷酸氢二钾 lg／L，磷酸二氢钾0．5g／L，硫酸镁 0．3g／L，pH 自然。 O 1．2 试验方法 1．2．1 茵丝培养 将培养好的菌丝球接种 5mL到液体发酵 时间／d