微结构中化学荧光猝灭反应与测试研究.pdfVIP

——一坌堕些芏塑堕些皇丝堕 微结构中化学荧光猝灭反应和测试研究 Iv．Bessoth 2 榇溢1 2^Manz (‘重庆大学环境与化学化工学院重庆400044) 关键词微芯片荧光猝灭测试 · 90年代以来，微机械结构用于化学与生化分析和环境监测越来越引起人们的*趣，这源于 微型全分析系统(／z-TAS)所具备的独特优越性m。如：更短的响应时间、更少的试剂和试样消 耗量、更易于小型化和自动化等等；其中最为突出的是微型化系统可获得很高的理论塔板数和提 高化学反应的效率l≈，因此较之于常规分析测试体系可以大大提高分析效率。徽混合反应装置则 是实现E述优越性的直接器件。 微混台是指在微结构中借用化工领域中描述分子级混合程度的概念描述混合现象，混合程 度将影响产物分布和反应体系的容量：混合一般包括两个步骤：非均相含微分散结构的分离过程 和相邻组分间扩散而引起的分子级均相混合过程。本文所述的微结构采用了层流的混合机理，利 用分散混合设计，通过管路几何交叉形状设计将液流裂分成更小的组分并重新以更小的分流汇台 的过程，此过程可产生更大的界面区域，l；|实现更有效的混合和反应，并进一步对所设计的含微 混台器材的化学反应微芯片实用性能进行了测试。 l微混合器结构设计 徽混合器的设计是基于分散混合的原则：缩短扩散长度也即缩短扩散时间。液流A的输入 管道被切分为一定数目的支流，对原主管道中液流的对称切分是通过完全对称方式重复切分实现 的，这使一个分子在从头到尾流经这些支管道及整个系统时通过的距离一致。在微混合器的另一 层上，液流B也同时被按t述方式切分，通过～系列夹层孔连接干第一层，以相同数目的支流 重新台并为一—体。此过程中每一支流管道中均具相同的流动阻力，相邻管道中液流依此合并，逐 级台并直到所育支流合并于最终主管道上。对于微芯片与毛细管界面．采用直接将毛细管插入在 微芯片的三个外接孔上。结构见图】。 围1徽芯片结构示意圈 2微芯片性能试验 乙醇溶液；H矿离子标液为1．000肌的原子吸收光谱用标准溶液；DMm型荧光显微光谱仪， 204 7205PMT型光电直读管(PMT)．Wmpump型注射泵等。 2·2微芯片测试装置微芯片通过毛细管和m巳还与微注射泵连接，液流在透明微芯片中 的流动和扩散过程可由荧光显微镜现测，插接PMT探头则可定量采集微芯片上选定区域的化学 反应光信号。 片直观测试观测流动和馄合状况。为获取更多有关混合和反应定量信息，以H酽+离子／RhodaminB 荧光猝灭反应进行测试。 3结果与讨论 3．1撤芯片混合效果 两种荧光染料Fluoresceine(绿色)和Rhodamme B(红色)在设计的徽芯片t混台可见明 显的层流模式，微混合器下端有交叉线流．进入长反应管道后逐步扩散形成均匀混台体系。根据 层流理论棚．在小管径和低流速条件下，相应的Reynolds常数很小，此时管道中液流以层流形式 为主，整个混台过程由扩散控制．扩散时间定义为 七～_历L2a对本实验的体系中扩散状况作简 单计算表明，增加层流数目可大大缩短扩散距离，并缩短扩散时间．这正是微混合器采用多交叉 支路设计原因所在。 3．2 B萸光羽。灭反应试验 Hg“离子／lmodamin 分别注入化学反应的试剂(Rhodamine B)和试样(H92+离子试液和缓冲溶液)，两者注 入混合后将继续发生荧光弊灭化学反应Ⅲ。由PMT直接置于微芯片上管道尾部选定的2 2am 长管路区域收集荧光猝灭的光信号。配制lO。moL几～lO“mol／L Hg“离子系列标准溶液，测