微量热法研究硒和腐殖酸的拮抗作用.pdfVIP

微量热法研究硒与腐殖酸的拮抗作用 微量热法研究硒与腐殖酸的拮抗作用 腐殖酸是一种天然的高分子化合物，广泛存在于土壤的腐殖质和低级煤等物质中． 在环境因素造成的地方性大骨节疾病因的研究中发现，环境低硒和饮用水中的有机物浓 度高均是大骨节病的致病因素[”．水中有机物主要成分就是腐殖酸，而硒是生命必需的 微量元素，而且能与许多环境毒物产生拮抗作用，与腐殖酸在生物效应方面可也能存在一 定的联系，因此，研究硒与腐殖酸之间的作用具有重要的意义． 本文以太肠杆菌为模型生物，用微量热法测定了大肠杆菌在硒代吗啉与腐殖酸联合 作用下的热功率输出曲线，并根据热功率输出曲线用细菌生长模型计算了大肠杆菌在硒 代吗啉和腐殖酸作用下的生长速率常数，探讨了硒代吗啉与腐殖酸之间的拮抗作用． 1实验部分 1．I材料 大肠杆菌(CCTCCAB91112)由武汉大学中国典型培养物保藏中心提供． medium)：取NaC[59，蛋白胨59，牛肉膏39，溶 培养基为营养肉汁培养基(peptone min，冰箱中放置备用- 于i000mL蒸留水中，pH=7．0．120C高压灭菌30 腐殖酸为生化试剂．硒代吗啉(se．I)由武汉大学化学与分子科学学院提供∞． 1．2仪器 实验采用瑞典产LKB一2277生物活性检测系统，有关仪器结构原理及操作详见文 献吼实验时系统控温于37‘。C． 1．3方法 tool·L～HCI，75％(v／v) mol·L—NaOH，0·1 采用停流法检测．测定前分别用0．1 mierop。 乙醇溶液和无菌水清洗管道和流通池，待仪器基线稳定后，用蠕动泵(LKB一2131 peristahicpump)以50mL·h-·的流速将菌液和药物混合泵入微量量计中，当样品 erpex mL)后停泵。记录仪自动跟踪记录流通池内细菌生长的产热曲线(P‘t 充满流通(约o．6 曲线)，当记录笔返回基线后，实验结束． 硒代吗啉、腐殖酸按实验要求配制成溶液．预先用含一定浓度的硒代吗啉的培养基 培养细菌，将在硒环境中培养的细菌接种到微量热实验用的培养基中(菌接种量为2× 106。eII。．mL-·)，再同时加入相同浓度的硒代吗啉和一定浓度的腐殖酸后，进行微量热 第三篇热动力学 2结果与讨论 2·1热功率输出曲线及化学参数计算 在310K下，用停流法测定了大肠杆菌在硒和腐殖酸作用下的热功率输出曲线，图谱 具有良好的重现性·根据关系式InP。一lnPo+kt，将热功率输出曲线上指数生长期的P —t值代入式中，用计算机进行线性拟舍得到大肠杆菌在不同浓度硒和砷作用下生长速率 常数女，k值列于表1． 表1太肠杆菌在不同浓度的硒代吗啉和腐殖酸作用下的生长速率常缸 !莹 懈 ㈣ _．吲—日翟 耋| ㈣ 0 2004006008001000 1200 讥g·mL-1 图l大杨杆菌在不同浓度的硒f目吗啉和腐殪酸作用下的生长速率常数^与囊，蛔断农度c的关系田 2·2讨论 从表1可看出，硒代吗啉在45和89腿·mLl之间、腐殖酸在100和30即g·mL“ 之间时，大肠杆菌的生长速率常数比对照组的要高，显示出在此浓度范围内，大肠杆菌的 生长速率常数比对照组的要低，而且生长速率常数随浓度增加而降低-说明在此浓度范围 内，大肠杆菌的生长速率常数比对照组的耍低，而且生长速率常数髓浓度增由盯而降低·说 明在此浓度范围内，硒和腐殖酸对大肠杆菌的生长有刺激作用；而硒代吗啉在268pg· mL“以上及腐殖酸在500pg·mL“以上的浓度范围内，硒和腐殖酸对大肠杆菌的生长具