我国粮食粉尘中苏云金芽孢杆菌的多样性与其杀虫特性的研究.pdfVIP

杀虫微生物专刊 武汉大学学报(自然科学版) Issue Special 1 Univ．(NaturalScienceEdition) 998年10月 J．Wuhan Oct．1998：1～3 我国粮食粉尘中苏云金芽孢杆菌的 多样性及其杀虫特性的研究+ 张文成 刘光宇 刘春勇 陈月华 任改新 (南开大学微生物学系，天津300071) 摘要我国粮食粉尘中的Bt资源研究表明：粮仓及贮粮生境Bf种群高度多样化．肯尼亚亚种(H4a4c)为 其优势种．7种RAPD—PCR全DNA指纹图有别于已知标准株的新分离株极有可能是新的血清型或新盼特异棣，6 个对鳞翅目及双翅gl幼虫有高毒力的Bt优良菌株可做为Bt杀虫剂的后备菌种．比较我国南北方粮食粉尘中Bt 的分离率，有由北向南逐渐增高的趋势． 关键词粮食粉尘，苏云金芽孢杆菌，多样性，RAPD—PCR r 分类号Q936 苏云金芽孢杆菌(Bacillus Bt)种 1．2 thuringiensis H一血清型未定株的RAPD—PCR鉴定 群不同株系的杀虫谱、毒力大小以及杀虫晶体蛋白 编码基因的多样性是目前人们关注的焦点．由于 科院微生物所合成．PCR用试剂均为华美工程公司 Bt开发费用低，能够防治多种农林及卫生害虫、易 产品．FTS一320热循环仪，94rc变性2．5min，然后 于工业化生产等优点，许多国家纷纷投入大量入力、 进行40个循环：94℃4．0 物力竞相研究与开发[1]．在全球范围内，从昆虫、土 后72℃延伸7rain，电泳检测并照相． 壤、粮仓、叶表及水域中等分离到许多Bt亚种，粮仓 棉铃虫(Heliothis 是害虫容易滋生和Bt资源丰富的一种微生态系统 的初孵一龄幼虫，淡色库蚊(Culex pipienspalle”j) ．本文拟对我国22个省市自治区粮食粉尘的Bt进引自南开大学元素有机所生测室，养至三龄进行测 行分离、纯化及H一血清型鉴定，分析Bt的分布规律 试．采用菌悬液光密度标定法：筛选棉铃虫高毒力 及其多样性，利用RAPD—PCR对BtH一血清型未定 株．参照许满荣(1986)进行蚊虫生物测定[“． 株进行鉴定。并筛选高毒力Bt菌种． 2结果与讨论 1材料与方法 2．1粮食粉尘中Bt的出菌土样率、分离率及H一血 I．1粉尘中Bt野生株的分离、纯化及H一血清型鉴清型鉴定 定 我国6个不同地区共22个省市自治区粮仓粉 178份粉尘样品来自我国22个省市自治区粮 尘中Bt的分离结果表明：华东地区及西南地区的分 仓及食品加工广，和用NB选择培养基分离Bt野生布频率最高，Bt出菌土样率分别为62．5％及46． 株，Bt抗原标准抗血清由本室制备，试管凝集实验 进行H一血清型鉴定． 市自治区的统计结果分析，江苏、重庆、四川、安徽的 +瞥囊夏翌婆婆l未；爵凛矛文成：男’34岁，副教控 武汉大学学报(自然科学版) Bt分离率最低，均未超过5％．综合分析我国粮食 粉尘中Bt的分离结果，Bt的分布表现出一定规律 性，即粮食粉尘中Bt的丰度有由北向南逐渐增加的 趋势