胰炎合剂治疗大鼠急性坏死性胰腺炎凋亡基因P53地研究.pdfVIP

胰炎合剂治疗大鼠急性坏死性胰腺炎 凋亡基因P53的研究 河北省遵化市民族医院普外科(wu)孟庆生 河北医科大学第三医院普外科 田玉芝 衰庆功 摘要 目的:急性胰腺炎是外科常见的急腹症之一，急性坏死性胰腺炎发病急剧，死亡率高，其发病机制 尚在探讨之中，缺乏有效的治疗方法。本实验通过中药复方(胰炎合剂)治疗急性坏死性胰腺炎大鼠摸型，分 析治疗前、后胰腺细胞凋亡、凋亡调控基因P53的变化，从细胞凋亡调控基因的角度阐释中药复方治疗急性 胰腺炎的分子生物学机制，完善中药治疗急性胰腺炎的作用机理，推动中草药的广泛应用。 方法:选用健康Wisatr大鼠120只，体重330士30g,雌雄不限，随机分为生理盐水对照组、单味大黄治疗 组、善宁治疗组、胰炎合剂治疗组。每组30只。通过向Wlstar大鼠胆管内逆行注射5%牛磺胆酸钠制备成急 性坏死性胰腺炎模型，术后分别用胰炎合剂、善宁、单味大黄、生理盐水进行治疗。术后2小时、4小时、8小 时、12小时、24小时、48小时、72小时处死大鼠，取血液标本测定血清淀粉酶，观察胰腺组织光镜及电镜变 化，胰腺标本行流式细胞术检测凋亡率、P53基因的表达量。应用统计软件对数据进行分析。 结果:各组模型血清淀粉酶水平明显上升。随治疗时间而出现特征性变化，胰炎合剂组及善宁组治疗后 血清淀粉酶下降较快，单味大黄下降较慢，生理盐水组下降最慢(P0.05或P0.01)。大体及光镜下可见 胰炎合剂组及善宁组较单味大黄及生理盐水组病变轻。胰炎合剂组及普宁组细胞凋亡率明显高于其他两组 (P0.05或P0.01);胰炎合剂组与善宁组比较无显著性差异(P0.05).凋亡基因P53的变化亦随时间 而变化，凋亡率的变化与P53基因表达时成正相关;胰腺合剂组及善宁组的凋亡基因P53表达盆明显较其他 两组高(P0.05或P0.01);胰炎合剂治疗组与善宁治疗组比较无显著性差异(P0.05) 结论:胰炎合剂在治疗大鼠急性坏死性胰腺炎模型中能引起腆腺炎腺泡细胞凋亡基因P53表达盘增加， 油 促进细胞凋亡，对大鼠胰腺组织具有良好的保护作用。中药复方胰炎合剂在临床治疗上具有疗效好、价格廉 等优点，值得推广应用。 关锹词:胰炎合剂 急性胰腺炎 细胞凋亡 通过中药复方(腆炎合剂)治疗急性坏死性腆腺炎大鼠模型,t析治疗前、后胶膝细胞凋亡、凋亡调控基 因P53的变化，从细胞凋亡调控基因的角度阐释中药复方治疗急性腆腺炎的分子生物学机制，从而完善中药 治疗急性胰腺炎的作用机理，推动中草药的广泛应用。 \ 材料与方法 1，实验对象 选择健康Wislar大鼠120只(由北京军区后勤部动物中心提供)，雌雄不限，体重330士30邵随 机分为四组:生理盐水对照组、单味大黄治疗组、善宁治疗组、腆炎合剂治疗组，每组30只。 2实验用药品、试剂及仪器 药品:胰炎合剂(河北医科大学第三医院制剂室提供)、善宁(瑞士诺华公司出 品)、牛磺胆酸钠(包头生化药业有限责任公司)、大黄(河北安国产)、生理盐水(石家庄市第四制药厂)。试 剂:淀粉酶(亚乙基阻断PNPG7法)试剂盒，德国利德受公司;P53鼠抗大鼠单抗,SANTACRUZ公司;仪器: FACS一420流式细胞仪，美国BectonDickinson公司，bII{2型酶标仪英国DenleyDrwo公司。 3实验方法 (1)术前准备:Wistar大鼠术前，小时禁食，自由饮水，2%RV-比妥钠腹腔麻醉(0.3m1/100g) (2)手术操作:找到大鼠胆总管后，在其对侧的十二指肠壁上做一长约0.5-1如的切口，将拉细的硬塑料空 心导管从十二指肠乳头处插人胆总管，用0号丝线结扎固定导管，用无创血管夹夹住胆总管肝端，用7ml注