先天性厚甲症Ⅱ型患者家系基因突变地研究.pdfVIP

和分泌，从而降低炎性细胞和血管内皮细胞间粘附，减少炎性细胞的浸润，进而减少细胞因子的产 生，减少角朊细胞的增殖。成纤维细胞在银屑病发病中的作用日渐重要，相关的研究也越来越多。其 以显著的降低成纤维细胞IL．6和IL．8的产生。 以上结果，进一步阐明了雷公藤治疗银屑病的作用机制，且对未来I临床上雷公藤单体药物的具 有重要的指导意义。 参考文献(略)。 先天性厚甲症II型患者家系基因突变的研究 冯义国 任小蓉 肖生祥 刘安 潘敏 西安交通大学第二医院皮肤科 710004 王文强 延安大学医学院医学遗传学研究室 摘要文j己J肛车坑 目的：报道一先天性厚甲症II型家系，并对其基因突变进行研究。 方法：抽取家系中3例患者、2例正常人及与该家系无关的10例正常人的外周血，采用全血基 结果：家系中共有4例患者(一例已死亡)，主要表现为厚甲，多发性脂囊瘤、掌跖角化。皮肤 结论：国内已报道的先天性厚甲症多为I型，而报道的先天性厚甲症II型家系较少。我们对该 患者家系的角蛋白17基因突变通过PCR扩增热点突变区和直接测序进行了研究。本研究发现患者角 此处的氨基酸替代可导致a．螺旋结构的扭曲，从而影响中间丝蛋白的形成和装配。而我们发现的突 变不在1A区，而位于非螺旋结构的头端，此处的突变导致先天性厚甲症II型的报道在国内外均未见 到。该家系是由K17基因一新的错义突变所致。 PC)是一组常染色体显性遗传病，特点是甲营养不良和 先天性厚甲症(Pachyonychiacongenita 不同程度的外胚叶发育不良。根据临床表现可分为四型。国内己报道的先天性厚甲症多为I型，我 们报道一先天性厚甲症II型家系。并对该患者家系的角蛋白17基因突变进行了研究。 材料和方法 1、临床资料：该家系中的先证者自1岁时头面部及颈部就出现针尖大小的黄白色结节，随着年 均有发病者，男女患者之比为1：1，患者双亲之一亦患本病，无病的双亲及其子女不发病，说明本 病为常染色体显性遗传。 剂盒由华美生物工程公司提供)。操作如下：取全血3001．tl加入离心管中；加入900ul红细胞裂解液 ul上清液以免抽掉白细胞 混匀；室温放置10分钟，13000xg离心20秒，小心吸去上清液，留下约20 沉淀：加入300IJI核裂解液，55℃水浴保温30分钟；加入1．5 加入100 u1异丙醇沉淀DNA加入乙醇漂洗： ul蛋白质沉淀液，室温13000xg离心1分钟；加入300 然后加入TE缓冲液溶解DNA。 lO例正常人(10例正常人的DNA 列为5’母cCTATAAAGGAAGCGGGC一3’，下游引物K17 ul缓冲液，10mMdNTP1 因1lrKl7B和1I，K17C，PCR反应总体积为50ul。反应液成分包括5 vl(2．5 公司产品)，25uM上、下游引物各1vl(由上海博亚生物公司合成)，Taq酶0．5 ul(Promega公司产品)，模板lO PCR产物用1．5％琼脂糖凝胶电泳分析。 4、DNA测序：取该家系中3例患者、2例正常人及与该家系无关的lO例正常人DNA 产物用双脱氧终止法测序，测序结果进行同源性分析并与Genebank中的K17序列进行对比。 ， 图1患者家系图 结 果 1、病理检查结果：切取患者背部囊肿行病理检查，囊肿位于真皮内，囊壁由数层复层鳞状上皮 组成，厚薄不一，常有折叠。壁内有一层嗜伊红性均质化的角质层，无颗粒层，表面有小的突起，似 大汗腺的断头分泌。囊内有多量