羊膜上皮程序性细胞亡超微结构研究.pdfVIP

Electr-Microsc．soc． 电子显赦学报J．Ch．n 19(3)：259～2602000年 259 羊膜上皮程序性细胞死亡的超微结构研究 沈忠英 陈铭华李乔山 沈健 (汕头大学医学眈病理教研室，汕头514031) 细胞捆亡可分为自发和诱导两大类，胚胎发育过程中某些细胞出现自发凋亡，又称程序性细 点，着重观察张力擞丝的改变。 材料与方法 新鲜足月胎盘，剥离胎儿面羊膜，0．25蹦胰酶处理．收集细胞悬液，离心，2．5“戊二醛固定， 翩样，作透射电镜检查，单细胞悬液作流式细胞仪DNA组方图检查。 结果 羊膜细胞超傲结构：正常羊膜上皮细胞，呈椭圆形，表面有微绒毛，胞浆丰富，有少数线粒体， 内质曙较发达。细胞棱椭圆形，核膜均匀饱满无皱褶，染色质细匀，少见异染色质，有一小核仁(图 1)，核周有纤细的张力教丝(图2)。部分细胞呈退化性变，有的细胞及其细胞核肿胀，有的细胞核 缩小，胞浆呈颗粒状；有的核呈毛玻璃状，无结构；有的核和浆出现多数空泡。这些改变属老化和 退行性变。 细胞弼亡形态改变可分为三期：早期，核染色质轻度凝集，胞质细胞器保持原状(图3)；中 期；细胞棱缩小变圈形，染色质呈块状或半月状，贴近核膜。胞浆可见线粒体肿胀和内质网扩张， 张力徽丝聚集呈柬状，原纤维缩短，失去原有纤细均匀排列，胞质儡可见空泡(圈4)；晚期，核改 变突出，有的核膜尚完整，但染色质选出至胞浆(图5)，染色质呈大块状，核膜保存，或呈致密巨 块或圈球状，棱膜消失，或核碎裂成小块状。胞质见张力原纤维消失，线粒体肿胀，呈空泡状，内质 罔扩张呈网格状，或呈囊泡状。胞膜出泡或破裂，细胞膜连同同缩接游离，形成细胞外凋亡小体， 有的裸露，有的有膜包绕(图6)。细胞核DNA组方圈，可见G。G。期前的弼亡峰，占总面积35％， 代表疆亡细胞核DNA改变。 讨论和结论 羊膜上皮进入程序性细胞死亡，其过程被分为三阶段：早期细胞校改变，染色质聚集，胞质变 化不明显。中期，细胞核和胞质同时发生改变，细胞核染色质进一步凝聚成块状，内质阿肿胀，核 周张力徽丝聚集呈柬。以上阶段细胞膜和核膜基本完好。晚期棱膜变质，染色质改变多样化，胞 质张力徽丝消失，线粒体，内质网肿胀或破裂，细胞膜破裂，细胞死亡。羊膜上皮PcD的形态特点 是细胞核改变最明显，最后核膜变质或消失，使染色质散落在胞质或至细胞外形成凋亡小体。胞 质中张力徽丝，在凋亡过程中聚集成柬，缩短，失去均匀规则排列，后期消失。细胞变圆缩小可能 和此细胞骨骼改变有关}羊膜上皮PcD和诱导凋亡相比较，以氧化锌诱导细胞凋亡为例口]，前者 细胞核改变在前，形式多样化，胞质改变在后其突出改变是张力徽丝聚集降解和消失，后者线粒 体改变在前，校改变在后。说明PCD自发弼亡始动于细胞核，张力傲丝和PCD有密切关系o]，因 此羊膜是研究PCD良好模型。 ●考文■ sA．Iden廿ficationof in via [1]G8vrie吐Y，sherm姐Y，Ben—sasson ceUdeathsitu sped矗c pmgrarnmed laben雌 屯子显微学报 J．Chin．Electr．Micfosc．soc 260 19(3)l259～2602000年 ofnucIearDNA CellBi01sis．，1992，119：493—501． fragmentation．J zY．shen w aLAri。xidei丑d眦s Molec． [2]shen J，c8iJ．ef ap。pc0 j丑vjtro．IrItern．J of档oph89％l∞捌norm Med．，1999，4{33—37． s BE．Actm enha