用色散近红外光谱仪与偏最小二乘法对大麦中蛋白质进行定量分析的研究.pdfVIP

第18卷，第4期 光谱学与光谱分析 ：：!!芏!皇 兰2：：：：：：：22：：：i兰2：：：：：!垒2：：j=：i： 垒：§：：：：!：：： 用色散近红外光谱仪和偏最小二乘法对大麦中 蛋白质进行定量分析的研究 吉海彦 严衍禄 中国农业大学基础科学技术学院，100094北京 近红外光谱是指波长范围为800nm～2500nm的区域，光谱主要是由分子的倍频和合频所产生，谱带较 宽，重迭严重，吸收强度较弱，依靠人的感官难以用传统方法解析图谱。但该谱区包含的信息量很大，从近 红外光谱可以得到分子中含氢集团的振动的信息。80年代以来，随着化学计量学的发展和计算机技术的引 入，解决了该谱区解析的困难，使得近红外光谱成功地应用于定量分析。近红外应用于定量分析具有分析速 度快、样品准各简单、从单个光谱可进行多种分析、不消耗样品、没有化学污染等优点，能广泛应用于谷物、 油料、食品、动物饲料、纺织品、药品、化工产品等的分析测定Ⅱq]。近红外光谱仪器通常有滤光片型、色散 扫描型、傅里叶变换型等。滤光片型的仪器由于只有一些固定的波长点，因此其分析能力有限。傅里叶变换型 近红外仪器扫描速度快、信噪比高．但价格昂贵。相比而言，色散扫描型仪器也可得到全光谱的图谱信息，扫 描出的光谱可用于进行定量分析，比较适合中国国情。常用的用于建立校正方程的方法有逐步回归分析法、 主成分回归法、偏最zJ、_-乘法等。其中以偏最／1,--乘法的算法较为先进且效果较好。本文用色散扫描型近红 外光谱仪采集样品的近红外图谱，并采用偏最小二乘法，对大麦中的蛋白质进行了定量分析。 实验方法 一组大麦样品共58个，选取其中40个作为校准集，其蛋白质含量范围为10．19～19．09，用于建立校准方 程；用另外18个样品作为预测集，其蛋白质含量范围为11．37～18．21，用于检验校准方程的可靠程度。 所使用仪器为采用漫厦射结构的光栅色散扫描型全光谱分析仪。该仪器用钨灯作光源，用硫化铅作检测 器。仪器由光谱仪主机和通用微机两部分组成，其间通过串行口进行联接。在光谱仪主机内有监控程序、与通 用微机串行通讯的发进程序。在通用微机上，有串行通讯接收程序和近红外定量分析软件包。 样品光谱曲秘定：将样品磨碎并过40日筛；将每个样品混合均匀后装入样品杯，每次装样量一致，用模 具将样品压紧，使样品表面平整。用硫酸钡作背景，每个样品扫描3次，取其平均光谱作为该样品的光谱。扫 描的波长范围为1480nm～2500nm，每隔4rim取一数据点，故每个样品光谱含有256个数据点。 大麦样品中的蛋白质成分含量由标准的凯氏定氮法测定，测出的结果作为化学值，用近红外方法测出的 结果作为预测值。用样品的近红外预测值和样品的化学值的相关系数R、相对标准偏差RSE(％)和相对偏 差RE(％)来衡量所建模型的好坏。R越高，RSE和RE越小，则所建模型越好。 结果与讨论 对校准集的40个样品，采用偏最／b--乘法进行建模。采用内部交叉证实的方法来确定最佳维数。得到最 为7．3％。 用建立的校准方程对预测集的18个样品进行预测，结果见表i。预测的相关系数为R一0．950，相对标准 偏差RSE一4．o％，预测样品的相对偏差最大者为7．8％。 106 光谱学与光谱分析 第18卷 Ta．1Thechemical valueandrelative value，prediction egTolrsof in set barley’sproteinprediction Chem． P州． Relative Cbem．Pred．Relative N0 No value v日m Emr。