金针菇%27FU19%27菌株胞外纤维素他解酶探究.pdfVIP

‘ 第30卷增刊 山东农业大学学报 1999年5月 of V01．30 Journal May1999 ShandongAgriculturalUniversity 金针菇“FUl9’’菌株胞外纤维素 分解酶研究 潘贞德王玉万 (中国农业大学，北京) 【摘要】本文研究了金针菇(Flammulinevelutipes)FUl9菌株胞外纤维索酶的一些生理 生化性质。实验结果表明：HUl9菌株具有完全的纤维索分解酶系；酶活性高峰期发生于子实 体生长阶段}不同纤维基质对酶活性有明显的影响；粗酶液中CMC酶。半纤维紊酶的最适反 应温度分别为45C、40C．最遁反应pH分别为4—4．5、5．5—6．5，酶的pH稳定范围分别为 4．5～7、3．5…10，半纤维索酶km值为6．67mg／ml。 关键词：金针菇·纤维素酶 金针菇(Flammulinevelutipes)是广泛人工栽培的食用菌优良品种。所用栽培基质 为棉壳、木屑、废棉等纤维废弃物。近年来我们选育了优质高产FUl9金针菇生产箧株。其 色泽浅金黄，生长后期及贮藏期无褐变，商品性能良好，十分受市场欢迎。为进一步了解该 萤株营养生理并为提高栽培技术提供依据，我们对其分解纤维素的主要纤维素酶的产生 规律及酶的某些生化性质做了一些研究。 1材料与方法 1．1菌种与培养 实验用金针菇(Flammuline 1h。接种后，在25‘C培养28d，之后于15℃培养。 1．2酶活性测定 层纱布过滤，滤液即为粗酶液。 定将上述提取的粗酶液适当稀释后，按照文献“珊33方法测定。CMC酶活力单位定义为 培养物}HC酶活力单位：IU=Img木糖／30min-g干培养物。 方法进行测定。酶活力单位定义为IU=lmg葡萄糖／30min．g干培养物。 30卷 对FUl9金针菇菌株测定结果表明，其在木质纤维索基质上生长期间，可释放半纤维 素酶和纤维素酶系中的CMC酶，FP酶及8葡萄糖苷酶，由此可见金针菇FUl9菌株胞外 纤维素分解酶系完全，这与我们对白色金针菇胞外纤维索酶研究结果相一致。 2．2培养温度对子实体形成和酶活性的影响 FUl9菌株子实体形成温度5—15℃。在25C以上不易形成子实体。由表1可见，菌 丝生长期及生理成熟期，纤维素酶活性较低，而现蕾及子实体成熟期，纤维素酶活性明显 增加。如CMC酶、FP酶可高于菌丝生长期酶活5倍以上，HC酶可高于菌丝生长期酶活7 倍以上，而二次菇现蕾之前的间期纤维索分解酶活普遍降低，待二次菇现蕾至成熟期，胞 外纤维素酶又出现二次高峰。以上结果表明：培养温度对于实体的发生有重要影响，胞外 纤维素分解酶随着子实体的发生而增加，从而为子实体的正常发育提供了必要的营养代 谢基础。侧耳、黑木耳o“3等其它木腐类担子菌在其生长发育期间同样表现出这种代谢规 律。由此提示，纤维素分解酶活性对于子实体形成出现高峰期很可能是木腐类高等担子菌 普遍存在的规律。 衰l FUl9在棉壳基质生长期间外纤维素分解酶活性 66--70d15C培养．闻期170一94d为二翻菇现蕾和子实体成熟期． 2．3不同纤维基质对酶活性的影响 纤维紊酶与半纤维素酶是诱导酶，研究不同基质对酶活的影响对提高金针菇转化基 质的效率有十分重要意义。由图1中可见，在利用不同基质培养FUl9金针菇时，对其胞 外纤维酶活有明显影响。子实体生长期间，废棉基质中纤维素酶活高于棉壳基质中酶活 性。从子实体发育看，金针菇FUl9菌株在棉壳和废棉两种基质上生长，绝对生物效率分 增刊 潘贞德等：金针菇“FU】9”苗株胞外纤维素分解酶研究 ·123· 维素分解酶活性与基质中纤维素降解量和子实体