柱上光度法检测中线性影响因素研究.pdfVIP

光谱仅嚣与分析 柱上光度法检测中线性的影响因素研究 徐秉玖 北京医科大学药学院(100083) 摘砖柱E光度检测法经常用于—巡馊用微柱分离的技术。人W】已{到拐蝴这种j如湖啶时 吸光度和组分浓度之间关系(^—C关系)的线性范围有限。本工作从光学角度对检测光束通过毛细 柱时的现象进行了研究，发现由于毛细柱是圆柱形的，A—c关系本质E是非线性的。由于所谓的 柱形池兢直、漏光期立和光柬筛眵效应，选恍关系可自皂是很差的，在一J蝌下测定脚匡确度 都可能受到影响．本文中采用自行编制的微机程序作出了A_C曲线，并求出这些曲线的相关系数表 示了所说的非线性． 关键词t柱：t光度法检测、吸光度—浓度线性关系、柱形池效应、漏光效应、光束偏移效应。 毛细管柱E7睑测的光学理诧研究 如同毛细管电泳和毛细管电色谱那样的为柱分离技术中广泛地使用了柱上光度法检测方法。 已经报道，这种检测方法除了确灵敏度较低的问题外，吸光度和鲴分浓度之间关系(A—七关系)的 线性范围也是较小的。这种较小的线性范围，或者非线性产生的原因如下； 假设有一柬入射光从一个 ＼ ＼ 长度l，宽度为w狭缝中射 出，经过外径为R，内径为r， 一 的毛细注射到光敏元件上，见 图l。假设从柱的中心到入射 1 光束一边的距离为)(c。在给 ， 定k．R与r值的矧q下，一 气 ：，j Ⅳ 束长为l，宽度为dx，原始辐 射强度为d10．与入射光束一 ＼／ ＼ 边的距离为x的单元光束通过 +_月—0 四种不同的路程螂卉铆岛捌光 第1期 光谱仅嚣与分析 图2表示一束入射光束(宽 度大于毛细柱外径)的纵切 面。当nⅥ．rx)【。+～·r，(n 。为流动相的折射率)时，单 元光束在^区域。在它所经过 的途径E它在空气、石英和流 动相的界面E折射四次流动相