中空纤维膜固定活肠链球菌地研究.pdfVIP

中空纤维膜固定活肠链球菌的研究 魏健敏、韩咏· (天津纺织工学院、膜分离研究所 邮编：300160) i 一前 言 近年来．膜科学的发展促使膜应用领域的不断拓宽。尤其膜在生物领域的应用在逐渐深入。 文献报导：日本用漠固定微生物的方法处理排水。用膜过滤技术培养微生物生产乙醇、乳酸、 维生素、丙酮、丁醇也有报导。用膜固定化细胞培养具有保健作用的双歧杆菌和基金重组菌、用中 空纤维膜培养克氏酵母提高菌体浓度、用中空纤维固定链霉素细胞生产四环素、固定大肠杆菌和诺 犬氏菌生产利福霉素、固定荧光极毛杆菌细胞生产尿酐、固定脱氮假单孢菌用于废水脱氮等都有报 导。 膜固定化微生物，是将膜作为载体．用化学或物理的方法把微生物细胞固定在膜上。微生物细 胞生长繁殖过程与产物代谢分离过程同时进行。用于微生物细胞生长繁殖用的膜组件即是微生物 细胞的培养器又是代谢产物的分离器。这样，能使细胞培养过程连续化．产物能及时收集。即简化 工艺、叉节约能源。膜应用也得到发展。 本论文是在纺织总会“中空纤维酶膜反应器”项目——中空纤维固定化酶制取麦芽糖及中空纤 维酶膜反应器样机制作的基础上的深入研究。是天津市自然科学基金“中空纤维细胞培养器及细 胞培养过程的研究”项目内容。 通过实验：在用平板膜固定活肠链球的基础上，选用不同材质的中空纤维膜用物理吸附的方法 固定乳酶生生产菌——活肠链球菌的研究．对不同材质中空纤维膜及改变实验条件对微生物细胞 固定的影响进行了探讨，并制作了中空纤维细胞培养器样机。 二实验方法 1主要材料 (1)聚砜中空纤维超滤膜：水通量18。／h牛血清白蛋白截留率99％ (2)聚丙烯腈中空纤维超滤膜：水通量2lo／h牛血清自蛋白截留率92％ (3)聚偏氟乙烯微孔滤膜：水通量24。／h。泡点压力法测定最大孔径为0．1,urn 三种膜均为天津纺织工学院制 (4)活肠链球菌 市售乳酶生(分离、复壮) 桂林制药厂 (5)牛肉汤培养液 自制 ．韩咏、天津合成材料研究所 2．仪器与设备： (1)超级恒温水浴 上海县五金厂 (2)HG一73—1恒温箱北京来广营医疗器械厂 (3)电热压力蒸汽消毒器 山东新华医疗器械厂 (4)无菌箱 纺院自制 (5)72～G分光光度计 上海分析仪器厂 3细胞固定化培养试验 (1)菌种： 后的苗液放入灭菌平皿中，再倒入吉有20％碳酸钙的牛肉汤琼脂培养基。37℃培养72小时后有 透明菌落出现，将菌落接入牛肉汤培养基培养后传人斜面，斜面经培养后放4℃冰箱保存备用。 (2)菌液制备 取斜面再传人牛肉汤培养基37℃培养24小时待用。 (3)中空纤维膜及实验器皿的处理： 实验用器皿都要灭菌处理，实验在无菌条件下进行，中空纤维膜及管道用3％福尔马林处理 后．用无菌水反复冲洗后使用。 (4)中空纤维膜固定化细胞工艺流程图见图(1) 1一超级恒温水浴 2一营养液贮罐 3一蠕动泵 4一调节阀 5一中空纤维膜组件 图(1)中空纤维固定化细胞工艺流程图 (5)中空纤维膜固定微生物细胞的培养。 将活肠链球菌悬液在无菌条件下接种到中空纤维膜组件里，开启蠕动泵使其不断提供营养液， 按图(1)工艺过程在0．1MPa、37℃条件下