脂联素对大鼠肝星状细胞胶原合成影响地研究.pdfVIP

能缓解者，予口服镇痛药，本组15例经口服散利痛片后1—2天疼痛逐渐消失。而有2例患者因高度紧张和 恐惧，1例在穿刺过程中即出现大汗、晕厥、呼之不应的疼痛性休克的表现；1例在穿刺后即出现腹胀烦 躁、穿刺处剧痛，向右肩背放射，经吸氧、补液、肌注阿托品1例使用度冷丁后2～3dx时症状改善。 2．4．3肝周临近脏器损伤本组6例发生气胸、3例胸腔积液、2例并发肾损伤，气胸患者在穿刺后出 现不同程度的胸痛、胸闷、呼吸困难，均早期诊断，且肺压缩率30％，无特殊治疗，经观察后气体自行 吸收；3例胸腔积液均自行吸收；2例肾损伤患者未见明显的临床表现，经术后超声和尿常规观察，无出 血等异常迹象，也未予进一步处理。 2．4．4血管迷走神经损伤迷走神经损伤可能与精神紧张和穿刺针损伤膈肌相关。本组2例穿刺后发 生胸闷、心率突然下降、出冷汗、恶心呕吐，经用654．2针20 mg对症处理后，心率很快恢复。 3．小结 患者的心理护理和穿刺知识的宣教，穿刺中谨慎操作，穿刺后加强生命体征及病情的观察，可以减少和 早期发现并发症，提高穿刺成功率。 参考文献(略) 103．脂联素对大鼠肝星状细胞胶原合成影响的研究 温州医学院附属第一医院感染内科(325400) 俞富军董培红范栩妃 肝硬化是各种慢性肝病的后期阶段，失代偿期肝硬化的5年病死率为70％～86％，而肝纤维化是各种 慢性肝病向肝硬化发展的中间环节，因此尽早阻止甚至逆转肝纤维化对于改善各种慢性肝病的预后、延 缓肝硬化的发生具有重要意义。 stellate cell，HSC)的激活是肝纤维化发生的中心环节，TGF．pl是目 目前认为，肝星状细胞(hepatic 前公认的HSC激活的最强因子，临床研究发现，脂联素有降低甘油三酯、血糖水平、改善胰岛素抵抗、 保护心血管内皮功能和抑制动脉粥样硬化形成等作用。最新的研究表明，脂联素尚有抗肝纤维化作用， 但具体的作用机制尚不甚清楚。本实验通过观察脂联素对体外分离的大鼠肝星状细胞TGF一131表达的影 响，以及I型胶原、透明质酸表达的变化，研究脂联素在抗纤维化过程中的作用及可能机制。 1．材料与方法 1．1细胞肝星状细胞株HSC．T6购自中国医学科学院肿瘤研究所，系SV40转染SD大鼠 肝星状细胞而成，其表型为活化的HSC。 1．2仪器与试剂C02培养箱为美国FORMA产品。相差倒置显微镜为日本OLympus产品。 试剂盒、IⅢAisoTMPlus提取试剂为TaKaRa公司。 1．3方法 1．3．1HSC培养与形态学观察大鼠肝星状细胞株HSC．T6，用含体积分数为1o％小牛血清的 ·328· 察细胞2次，每天换培养液1次。待细胞基本长满培养瓶底后可传代，传代三四次，细胞生长活跃，增殖 明显即可用于实验。 1．3．2HSC．T6细胞培养用0．25％胰蛋白酶消化增长至接近汇合时生长状态良好的细胞，用含体积 分数为10％d,牛血清的RPMI1640培养液制成单细胞悬液，细胞计数后配制成1．0105细胞／L，将单细胞悬 孔不加脂联素，作为对照组，培养48h。 1．3．3RNA的提取及半定量RT-PCR检测根据实验分组，在刺激时相点结束后，加入RNAisoTM Plus提取细胞总RNA，以30uL去RNase水溶解，采用紫外分光度仪测定浓度，利用琼脂糖凝胶电泳 检验RNA的质量。RT-PCR检测采用两步法进行。逆转录过程以Random min，65。C聚合延伸30min，98。C灭活逆转录酶5min， Polymerase为逆转录酶，反应条件为：30C保温5 5C稳定5 l上下游引物序列分别为： min。PCR过程以3．磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为内参照。TGF．13 P1：57一CAAAGACATCACACACAGTA一3’ ，扩增 GTGCCAGCCTCGTCTCAT-3