用于固定化生物活性炭的高效脱酚菌地研究.pdfVIP

5 OrhonD． andOkutman D． assessmentofresidual matterfor Respirometric organic domestic andMicro sewage．Enzyme bial Technology，2003，32：560～566 6施汉昌，柯细勇，张伟，张杰远．用快速生物活性测定仪测定活性污泥生物活性的研究．环境科学，2004，25(I) 67～7l 用于固定化生物活性炭的高效脱酚菌的研究 王晨，赵立军，马放，郭静波，山丹 (哈尔滨工业大学市政环境工程学院，哈尔滨，150090) 摘要：含酚废水是一种来源广、水量大、危害十分严重的工业废水。为了利用固定化生物活性炭深度处理哈尔滨气化 厂的含酚废水，本研究进行了前期筛选高效脱酚菌的工作。从哈尔滨气化厂曝气池中分离到4株高效脱酚菌，分别属于假 pH值分别在34C和7时，混合菌对液体培养基中苯酚降解率最高，振荡培养时混合菌对苯酚的降解率高于静止培养。经 过筛选驯化的脱酚菌可以在哈尔滨气化厂含酚废水中生长。本研究为固定化生物活性炭在含酚废水深度处理上的应用打下 坚实基础。 关键词：高效脱酚菌；固定化生物活性炭；含酚废水；苯酚 引言 含酚废水是一种来源广、水量大、危害十分严重的工业废水。作为一种重要的化工原料或中间体，酚类 化合物被广泛用于树脂、尼龙、抗氧化剂、聚酯、药品、杀虫剂、炸药、染料和汽油添加剂等许多商品的生 产中。酚的毒害作用表现为：苯酚可使皮肤过敏，能使人的神经、肝、肾受损，长期饮用被酚污染的水源， 会出现慢性中毒、头痛、及记忆衰退等症状，食用酚中毒的鱼会引起呕吐及腹泻；当水体中含酚浓度达到 1～2mg／L时，鱼类即出现中毒症状，超出4～5mg／L时，将引起鱼类的大量死亡；酚的毒性能大大抑制水 中微生物的生长速度，影响水的生态平衡；使用含酚废水灌溉农田，也会影响作物生长，危及人体健康[¨。 近年来，随着酚类化合物的需求增加和生产规模不断扩大，含酚工业废水的排放给环境造成了严重污染。处 理含酚废水已成为水处理的一大难题。本研究是通过对哈尔滨气化厂曝气池活性污泥中的菌种进行分离得到 4株高效脱酚菌，并在菌株形态特征，生理生化等方面做了初步鉴定，对其培养条件进行了研究，为利用固 定化生物活性炭[2]深度处理含酚废水打下良好基础。 1材料和方法 1．1 样品的采集 从哈尔滨气化厂处理含酚废水的曝气池中取活性污泥样品250mL作为菌种来源；取含酚废水原水25I。 驯化菌种。 1．2培养基 1．2．1富集培养基 HP04 葡萄糖lg；蛋白胨0．59；K20．19；MgS04 20rain，视需要加适量灭菌废水和苯酚。 1．2．2分离培养基 KzHP041．69；KHzP040．49；NH4NOa0．59；MgS04·7HzO0．29；CaClz·2HzO25mg；FeCl3· 6H202．3mg；蒸馏水1000mL；pH值7．0；115。C灭菌20min，视需要加适量灭菌废水和苯酚。 1．3分离方法 。 1．3．1富集培养 将水样静置，弃去上清液，取活性污泥接种于富集培养基中，接种量为5％，30。C、120r／min恒温振荡 432 培养，见有明显生长(目测培养液混浊度增加)时，移至新鲜培养基中，继续振荡培养，每次移种逐步提高 酚的含量和废水占培养基的比例，至酚浓度达lOOmg／I。，废水所占比例达1／4。 1．3．2分离纯化 用灭菌移液管吸取经富集培养和驯化的培养液lOmL，加入含90mL灭菌水的三角瓶中，加入数粒玻璃 珠充分震荡，制备系列稀释液，取稀释倍数为10_5～10～s的稀释液各一滴，涂布平板法接种到含酚培养基 上，每一个稀释度做两个平行，涂布的平板于室温下静置2h后，放于恒温培养箱倒置培养2～3天。 1．4分析方法 1．4．1细菌生长量 细菌生长量采用平板菌落计数法测定。 1．4．2苯酚的测定 苯酚含量的测定采用改进的4一氨基安替比林光度法[“。 1．4．3菌种的鉴定 用显微镜观察菌体形态、鞭毛、芽孢及菌落特征[4]；