压电凝血反应中的曲线拟合和最大曲率终点法的研究.pdfVIP

·241· 否?则以SDS—PAGE电泳、Western—blot法来鉴定其抗原 的单克隆抗体所识别。结论：噬菌体展示技术可以有效地模 特性，以及动物免疫诱导免疫应答能力。结果：从半琼脂平板 拟病毒蛋白(PP65)抗原的表达，结合正在着手的动物免疫试 上形成的噬菌体斑中获得了重组的T7一PP65噬菌体，其分 验的成功，将为HCMV疾病的预防、治疗和控制的研究领域 子大小与预期一致；PCR扩增后也获得阳性。更明确的是噬 中对其抗原筛选或疫苗的研发提供科学依据。 菌体表达在其头蛋白上的PP65模拟表位可以被天然PP65 压电凝血反应中的曲线拟合及最大曲率终点法的研究 赵猛府伟灵 陈鸣夏涵 罗阳 王丰赵渝徽 将压电石英谐振现象应用于医学生物学研究是近几年刚 可以无限接近原始曲线，故本文采用指数衰减模型、幂函数模 刚发展起来的全新技术，其基本原理是利用石英晶体振荡频 型和多项式模型来研究压电凝血反应的曲线拟合。 率对石英晶体表面质量负载(质量效应)和反应体系物理性状 1．2曲线拟合原理：根据原有资料的性质和实际数据所 如密度、粘度、电导率(菲质量效应)等的改变高度敏感的特 呈现的趋势，按照适当的曲线类型估计出最可能的回归曲线， 性，通过对石英表面适当的生物学处理，构建出具有具有亚 使估计误差最小或接近最小的方法称为曲线拟合。曲线拟合 ng级的检测能力的生物传感器。目前已经在基因、蛋白、病 后，其排除的误差主要是实验的偶然误差，如抽样误差，而原 原微生物及凝血功能检测等诸多方面得到成功的应用。在前 数据的主要特性以及实验的系统误差并不会被改变，但是系 期的研究中，压电凝血反应终点判断始终是一个重点和难点。 统误差我们可以采用其他的办法进行修正。 以往认为，由于质量效应，在反应接近终点的时候，形成的纤 根据选定的曲线类型，曲线拟合要解决的问题就是通过 维蛋白凝块收缩，与石英晶体脱离，使频率突然小幅上升，随 迭代求解的方法，给出曲线类型的参数估计值，求出决定系数 81／rn of 即又因纤维蛋白块的沉降，频率再次下降，形成一个终点频率 R2，并且使得拟合残差平方和(errorsquares，SSE，以下 峰，最后趋向稳定。因此，我们将此频率峰作为凝血反应终点 采用该缩写形式)最小。 的标志。但是，影响这个频率峰形成的因素很多，其中，残留 在1．1中选择的三种曲线模型中，指数衰减和幂函数我 血小板的质和量、晶振表面的微细结构、检测池壁的微细结构 们很容易通过方程变形(等号两边取对数)，转换为一元一次 等三大因素是造成该频率峰出现的时间和峰形不一致的主要 线性回归模型。而对于多项式，则可以将变量x的每个项次 原因，从而影响了检测的重复性和准确性。本研究采用曲线 看作一个新变量玛，从而将其转换为多元线性回归模型，从而 拟合和最大曲率终点法来判断反应终点，希望能用数学模型 大大简化曲线方程参数的求解过程。下面给出多元线性回归 模型方程参数估计的过程。 来最大限度地减小上述三大因素造成的误差，并为自动判读 假定因变量Y与自变量)(；(i=1，2，…r)之间存在多元线 软件的编写和压电凝血检测的推广应用打下基础。 性函数关系，设其函数为： 1．原理和方法 1．1压电凝血反应蓝线模式及拟合曲线类型的选择凝 Y=F(xi，融，＆，…)+￡，其中，x为自变量，融，陉，…艮