反铂对尿酶活性和构象影响的研究.pdfVIP

反铂对尿酶活性及构象影响的研究 韩玮杜为红李芝芬王保怀 00871) (北京大学物理化学研究所北京L 屎酶是人类得到结晶蛋白的第一个酶[1】，其生理意义在于它可催化尿素水解．最新发现此 3一 酶的活性与枣染引起的屎结石， 胃溃疡及胃癌等疾病有关[2】．顺第ci di aminodichioroplatinum(i-[)(Ci atin，TDDP)与其异构体顺铂相比，没有抗癌活性，但有研究报道反铂与某些蛋白的 (Transpl 相互作用和顺铂相比显示不同的结合亲和性[4】．本文通过微量量热法及差示扫描量热(I)SC)法 研究了反铂对尿酶活性的影响，通过圆二色谱法和荧光光谱法研究了反铂对尿酶掬象的影响， 并将结果和顺铂与屎酶的作用相比较，为生化及药物研究提供相关数据． 一实验 L i-1 1．在5hugo 5K平衡约2小时后测定水解尿素(混合后终浓 22小时后，置于Calwt微量量热器中．于298．1 ml。和0．30mgml。1下测定．酶的扫 0m01 2mg 度为0．5 l“)反应的△，Hl。实验分别在屎酶0．1 对活性由反应热功率的变化来表示[3]．买验发现随着反铂浓度的增加．酶活性逐渐降低直至消 失(见图I)．反铂低浓度时活性降低速度比高浓度对大．而相同酶浓度下顺铂浓度与酶活性呈 线形关系。比较而言，酶受反铂影响失活更快并表现非线彤关系(见图2)． j；{o《；口●t| ITm=mPq／mⅢr IDDPI，m-__II 目2■帕#置抽对罩●*性■响也枉 田l戾甘对犀辟活性的I}响 2珥_一 尿■)：●0l 譬镏”翟：灯 ●0j■日111 l“变化 2．DSC法研究屎酶热变性分别受反铂和顺铂影响显示，随着反铂浓度从0到吼36moI 尿酶热变·陛温度有显著降低，但变性培变值变化较小(见表I)．面顺铂浓度从0到0．SOmmoi【_ O6 qi6 S 7 l2 q7 l 24 q6 36