大鼠面神经挫伤眼轮匝肌超微结构地研究.pdfVIP

大鼠面神经挫伤眼轮匝肌超微结构地研究.pdf

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电子显般学报 J.chin.Electr.Mkrosc.Soc 10(3)I225~2262000年 225 大鼠面神经挫伤眼轮匝肌超微结构的研究 孙桂媛郭小冬祝淑文刘冬娟 (中国医科大学组织学胚胎学研究室,沈阳110001) 面神经因其特殊的解剖位置结构特点,使其易受挫伤而致面瘫。近年来在耳外科、医源性后 遗症、肿瘤及其它疾病所致的倒伤性面瘫正处于上升趋势。有关研究仅限于普通光镜及口轮厦 肌方面的研究,但关于眼轮匝肌及其运动终板的研究尚未见报道。本实验通过挫伤大鼠面神经分 支(鞭支和颤支)制作了眼轮匝肌麻痹的动物模型,采用酶细胞化学方法和透射电镜技术,对眼轮 匝肌及其运动终板的酶活性和超徽结构改变进行定时、定位、定量的研究和观察,旨在揭示面神 经挫伤后眼轮匝肌的肌纤维及其运动终板的酶细胞化学和超徽结构变化的规律,为临床上由面 瘫而致的麻痹性眼睑闭合不全及麻痹性下睑外翻的诊治提供科学的实验依据和理论基础。 机分成13组,实验组为神经挫伤术后第l、3、7天,2、3、4、5、6、7、8、9、10周不同时间组。正常对 照组选用健康大鼠及各实验组中面神经非创伤翻的眼轮匝肌。 1.面神经挫伤动物模型制作:将实验组大鼠行定位、定量、定时的面神经颞支和颧支挫伤。术中 尽量不挫伤神经外膜,不牵拉神经[1]。用小号去齿持针器持续夹持2支神经各15s(压力为 5.5kg,挫伤面积为1.8mm2)。行挫伤侧肌电囹检查,未见波形。 2.酶组织化学方法:动物麻醉后,取双侧上、下限睑分94置人Holt氏液内(一4℃,8~12h)。恒冷 箱制备15pm厚冰冻切片,之后进行sDH—AchE结合染色o]。 3.透射电镜标本制备:动物麻醉后,迅速取下双翻眼轮匝肌,置入用0.1rn01/L二甲砷酸缓冲液 7.20)配制的2.5%的冷戊二醛内固定(一4℃,2“),同种缓冲液漂洗,1“镱酸后固定 (pH 1.5min;酒精系列脱水,丙酮置换,Epon812树脂包埋剂浸透,包埋;70℃聚合24h,制备超薄切 片,醋酸铀、柠t酸铅双重染色。透射电镜(JEM一1200EX)下观察。 结果大鼠眼轮匝肌以自肌纤维为主。挫伤术后l周肌纤维呈轻度萎缩改变,SDH含量也相应 下降}挫伤术后3周末变化最显著,术后8周sDH活性及肌纤维直经接近恢复正常。电镜下,根 据z线竟窄,线粒体多少可区分出三型肌纤维,正常组肌丝与z线捧列规则,运动终板突触后膜 形成的接头褶结构清晰。面神经挫伤后3周,肌纤维内线粒体呈空泡变性,嵴断裂,甚至消失;肌 原纤维间晾增宽,部分肌丝溶解,有的明暗常不清,到第3周末各型肌原纤维超徽结构趋向一致, 不能辨别各肌类型(图1)。4~5周时,运动终板突触后膜接头褶部分模糊不清(图2)。面神经挫 伤后8~10周,超般结构接近恢复,其中线粒体明显增多增大,肌丝捧列较规则。运动终板突触后 膜接头褶清晰可见。 讨论实验结果表明眼轮匝肌与口轮匝肌不同,主要由快缩纤维即白肌构成,肌原纤维丰富,Z 线较窄,可使眼睑完成灵敏的瞬目反射。面神经挫伤后白肌萎缩最为明显,这与四肢肌结果相一 致o]。因此临床面瘴患者眼部挫伤的程度大于口部。本实验发现面神经挫伤后第4~5周时运动 终板发生了萎缩改变,AchE活性也同时下降.但仍晓于肌纤维的改变,支持了运动终板在其支 配神经挫伤后退变较慢的说法“]。白肌纤维对挫伤最敏感,且反应剧烈,恢复也晚。眼轮匝肌在术 后8周末才接近恢复正常,而口轮匝肌在术后7周已完全恢复正常,说明口格匝肌可能与跟轮匝 电子显散学报 J.Chin.Electr.Microsc.S0c. 226 19(3):225~2262000年 肌不同,以红肌中间肌为主。 ’考文t [1]张宗惦.许健红.第三军医大学学报,1998,10(增刊):9B. E2]束可赣,王彦,■嗣学杂意,】985,】8(4)一357—359. [3]孙挂叠.中国医科大学学报,1991,20(1)一12—15. aI.Acta.()tol8ryngoI_,19町,1Il(3){607·614. [4]Yoshih拙T。et 图l面神经挫伤后第3周.鼠轮匝

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