一种定量探究细胞迁移动态的微流控芯片.pdfVIP

2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议 一种定量研究细胞迁移动态的微流控芯片 郑春红，虞之龙，周莹，陈涛，周宏伟，张先念，邱海维，庞玉宏，黄岩谊* 北京大学工学院，北京大学生物动态光学成像中心，北京 100871 010 yanyi@pku.edu.cn 细胞迁移对于很多生物过程来说都是很重要的，例如癌症转移、胚胎发育、伤口愈合和 免疫响应等。目前最常用的研究细胞迁移的方法之一是划痕法(1，2)，这种方法虽然操作简 单但是在制作划痕时对细胞有极大的损害。一些研究小组发明了若干在微流控芯片上研究细 胞迁移的方法，他们使用电击、胰酶消化、PDMS 片微模板、自组装单层及表面张力等手段 来产生“伤痕”区域。我们发展了一种新型集成的微流控芯片——填空芯片来研究细胞的迁 移。这种芯片制作简单，操作方便，对细胞没有任何损伤，并可以实现实时拍摄精确记录细 胞在不同时刻的迁移状态，结合图像处理的方法对细胞迁移速度进行判断从而得到定量的结 果。 “填空”芯片由两层管道构成，流体层管道（下层管道）用来培养细胞，控制层管道 （上层管道）用来控制液体的流动及生成“伤痕区域”（图 1）。我们每隔一段时间拍摄一次 图像并计算出没有被细胞填充的区域，以此衡量细胞的迁移速度。 我们所有的实验都采用人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为研究对象。我们发现起始伤痕 面积的大小对细胞的迁移愈合速度没有影响。我们用“填空”芯片测试了不同浓度的血清对 细胞迁移速度的影响。由图 2 可发现，血清是细胞存活及迁移必须的营养。当浓度降低到零 时，细胞会停止迁移。培养液中血清含量越高，细胞迁移速度越快。降低血清的传统方法不 仅抑制了细胞的增殖同时也影响了细胞的迁移。 参考文献 1. Chun-Chi Liang, Ann Y Park, and Jun-Lin Guan, NATURE PROTOCOLS 3,329, (2007). 2. Song Li, Methods in Molecular Biology 294. 图 1 “填空”芯片设计示意图。(a)研究不同的起 图2 不同血清浓度对细胞迁移速度的影响。血清 始伤痕面积或形状对细胞迁移速度的影响。(b)研 浓度依次为20%，5%和0%。所有曲线为阀内没有细 究培养条件不同或基因表达量不同对细胞迁移的 胞的区域的面积随时间变化的图。 影响。